重组B7-H1IgV融合蛋白的表达、纯化及活性鉴定

来源 :中国生物制品学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jematrix

【摘要】

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目的以B7-H1为靶点，研制肿瘤免疫治疗蛋白疫苗。方法将人B7-H1胞外片段IgV区基因插入pQE-30原核表达载体，转化大肠杆菌，经IPTG诱导表达。Ni^2＋-NTA亲和层析纯化蛋白，Western blot

【作者】

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王伟华张英起颜真

【机构】

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第四军医大学药学系生物技术中心

【出处】

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中国生物制品学杂志

【发表日期】

：

2007年1期

【关键词】

：

B7-H1IgV融合蛋白肿瘤免疫治疗 B7-H1IgV fusion protein Tumor Immunotherapy

【基金项目】

：

教育部“长江学者和创新团队发展计划”（项目编号：IRT0459）.

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目的以B7-H1为靶点，研制肿瘤免疫治疗蛋白疫苗。方法将人B7-H1胞外片段IgV区基因插入pQE-30原核表达载体，转化大肠杆菌，经IPTG诱导表达。Ni^2＋-NTA亲和层析纯化蛋白，Western blot鉴定。用纯化的rhB7-H1IgV蛋白免疫昆明小鼠，经ELISA、流式细胞术、免疫组化技术和CDC试验测定融合蛋白及其抗血清的生物学活性。结果所构建的pQE-30-Tr-B7-H1IgV表达载体，能稳定表达rhB7-H1IgV蛋白，经纯化后免疫昆明小鼠，可获得高滴度抗B7-H1抗血清。经流式细胞术

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