【摘 要】
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目的 探讨微小RNA-195(miR-195)在胃癌干细胞中的作用及其调控机制.方法 通过干细胞标记物CD44分选胃癌干细胞,采用实时定量PCR方法检测胃癌干细胞中miR-195 mRNA表达.使用慢
【机 构】
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目的 探讨微小RNA-195(miR-195)在胃癌干细胞中的作用及其调控机制.方法 通过干细胞标记物CD44分选胃癌干细胞,采用实时定量PCR方法检测胃癌干细胞中miR-195 mRNA表达.使用慢病毒表达载体构建miR-195稳定表达细胞系,采用体外成球实验和Transwell实验检测其自我更新能力和侵袭能力,生物信息学进行miR-195靶基因预测,Western blot法检测Akt3蛋白表达,双荧光素酶报告基因实验鉴定miR-195靶基因.结果 与CD44-胃癌细胞相比,miR-195在CD44+胃癌细胞中的表达下调(P<0.01).过表达miR-195后,Oct4、Sox2和Nanog mRNA表达降低,成球能力和侵袭能力被抑制(P<0.05或P<0.01).生物信息学分析预测miR-195候选靶基因为Akt3;Western blot法检测过表达miR-195后的Akt3蛋白表达降低(P<0.05);而双荧光素酶报告基因实验验证Akt3并非miR-195的直接靶基因.结论 MiR-195可能通过非靶向调节Akt3的方式抑制胃癌干细胞的干性特征和侵袭能力,为胃癌治疗提供了一个潜在靶点.
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