【摘 要】
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目的构建融合表达Fas死亡信号激发域(Fas activation domain,FasAD)的重组载体FasAD-pTYB2.方法应用半巢式逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)技术克隆Fas死亡信号激发域cDNA片段Fa
【机 构】
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第一军医大学南方医院儿科,第一军医大学分子免疫研究所,第一军医大学南方医院血液科
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目的构建融合表达Fas死亡信号激发域(Fas activation domain,FasAD)的重组载体FasAD-pTYB2.方法应用半巢式逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)技术克隆Fas死亡信号激发域cDNA片段FasAD,插入通用载体pGEM-T中鉴定,然后装入Intein表达型原核载体pTYB2中,经IPTG(isopropylthio-β-D-galactoside)诱导表达融合蛋白结果DNA序列测定显示克隆的cDNA片段序列正确.初步获得融合蛋白的表达,经Westem-blotting鉴定,融合蛋白具有良好的Fas抗原性.结论上述结果提示可利用该表达型重组质粒制备人Fas死亡信号激发域多肽/intein的融合蛋白.
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