【摘 要】
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目的筛选和分析日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)新基因,为血吸虫疫苗研究提供新的候选分子.方法以日本血吸虫雄性成虫抗原免疫兔血清为探针,筛选Sj成虫cDNA文库,对阳性
【机 构】
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中南大学湘雅医学院寄生虫病教研室,Molecular Parasitology Group
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目的筛选和分析日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)新基因,为血吸虫疫苗研究提供新的候选分子.方法以日本血吸虫雄性成虫抗原免疫兔血清为探针,筛选Sj成虫cDNA文库,对阳性克隆的插入片段进行PCR鉴定及测序分析.通过互联网对测序获得的核苷酸序列进行同源性分析,并预测新基因编码蛋白的结构与功能.结果筛选获11个阳性克隆,其插入Sj cDNA片段大小在0.7～2.3kb之间.对部分阳性克隆进行测序分析,获两个Sj新基因,即Sj-MA及Sj-Cp8(登录号分别为AF519808和AF524896),分别编码249和71个氨基酸的核内蛋白和胞浆蛋白.Sj-MA蛋白含有9个蛋白激酶C磷酸化位点、3个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、2 个酪氨酸激酶磷酸化位点和1个N-肉豆蔻酸化位点.Sj-Cp8蛋白含一个跨膜区、3个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、2个N-肉豆蔻酸化位点.结论筛选Sj成虫cDNA文库所获得两个新基因,其编码的蛋白可能为存在于胞浆和胞核内的日本血吸虫的重要信息传递分子,有望成为新的血吸虫病疫苗候选分子.
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