【摘 要】
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目的:克隆微小RNA hsa-miR-610并构建其慢病毒表达载体。方法:将PCR扩增得到的miR-610前体序列和pcDNA6.2-GW/EmGFP载体经双酶切后连接产生pcDNA6.2-miR-610真核表达载体,双
【机 构】
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武汉大学中南医院; 武汉大学基础医学院; 武汉市第一医院;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(编号:30971132)
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目的:克隆微小RNA hsa-miR-610并构建其慢病毒表达载体。方法:将PCR扩增得到的miR-610前体序列和pcDNA6.2-GW/EmGFP载体经双酶切后连接产生pcDNA6.2-miR-610真核表达载体,双酶切后测序鉴定,筛选阳性克隆。通过BP反应及LR反应将pre-miR-610克隆至慢病毒目的载体pLenti6/V5-DEST,构建miR-610的慢病毒表达载体pLenti6/V5-miR-610。结果:将构建好的慢病毒表达载体导入大肠杆菌Stbl3进行扩增,测序表明所构建的载体与预期的完全一致。结论:成功构建了miR-610的慢病毒表达载体pLenti6/V5-miR-610,为深入研究miR-610的生物学功能奠定了基础。
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