小鼠IDO真核表达载体的构建及其在未成熟树突状细胞中的表达

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lollio

【摘要】

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目的构建小鼠pEGFP-N1-IDO基因真核表达载体并观察其在未成熟树突状细胞中的表达。方法利用RT-PCR方法扩增小鼠IDO基因全长,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pEGFP

【作者】

：

安晓静钱桂生王长征夏俊波党涛廖伟

【机构】

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第三军医大学附属新桥医院全军呼吸内科研究所,第三军医大学附属新桥医院心血管内科

【出处】

：

第三军医大学学报

【发表日期】

：

2008年1期

【关键词】

：

吲哚胺2 3-双加氧酶绿色荧光蛋白真核表达载体未成熟树突状细胞 indoleamine 2 3-dioxygenase green fluorescent

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目的构建小鼠pEGFP-N1-IDO基因真核表达载体并观察其在未成熟树突状细胞中的表达。方法利用RT-PCR方法扩增小鼠IDO基因全长,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pEGFP-N1,经酶切和测序鉴定后,用DOTAP脂质体转染法转染未成熟树突状细胞,通过G418筛选,转染的未成熟树突状细胞,用倒置荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,用RT-PCR、Western-blot检测IDO的表达。结果小鼠全长IDO基因序列正确插入pEGFP-N1载体,与GenBank中报道的序列一致,成功构建了pEG

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