【摘 要】
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为定量DNA断裂末端评价DNA的降解程度,以饱和标记(TdT)法定量DNA末端最大标记量(Lmax);并用流式细胞分析(FCA)、原位DNA末端标记(TUNEL)和琼脂糖电泳检测或标记DNA降解片段.
【机 构】
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华西医科大学附属第一医院医检专业,Department of Pathology
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为定量DNA断裂末端评价DNA的降解程度,以饱和标记(TdT)法定量DNA末端最大标记量(Lmax);并用流式细胞分析(FCA)、原位DNA末端标记(TUNEL)和琼脂糖电泳检测或标记DNA降解片段.结果发现: a.TdT法最低检测限5 ng DNA,线性范围为5～5 000 ng,较检测DNA降解片段的琼脂糖电泳敏感200倍以上;b.地塞米松(DEX)诱导淋巴瘤(Raji)细胞凋亡产生的Lmax呈DEX剂量与诱导时间依赖性增加;c.自发性高血压大鼠(SHR)心肌的Lmax呈年龄依赖性增加并与正常对照鼠(WKY)相比差异非常显著(P＜0 01);d T dT法定量Lmax与FCA、TUNEL或电泳分析的相关性良好(r＞0 98).TdT法定量Lmax敏感、特异、准确,可应用于分子生物学、细胞生物学,尤其是细胞凋亡动力学DNA降解评价的定量研究.
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