【摘 要】
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目的:确定来源于成年人骨骼肌的干细胞在离体条件下能否分化为神经细胞,为骨骼肌干细胞应用于移植治疗神经系统损伤和疾病打下基础. 方法:采用适用于大鼠的神经细胞诱导分化
【机 构】
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第四军医大学全军神经科学研究所,波恩大学神经生理学教研室
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目的:确定来源于成年人骨骼肌的干细胞在离体条件下能否分化为神经细胞,为骨骼肌干细胞应用于移植治疗神经系统损伤和疾病打下基础. 方法:采用适用于大鼠的神经细胞诱导分化液诱导贴壁的人成肌细胞向神经细胞的分化;采用免疫细胞化学染色并结合Western Blot及RT-PCR等技术对不同培养液作用后的人成肌细胞进行β-Tubulin Ⅲ,Neurofilament Mr 68×103和GFAP表达的研究. 结果:用诱导分化液作用后,未见小的、伴有突起的放射状形态的神经细胞;抗β-Tubulin Ⅲ对经神经元-胶质细胞诱导分化液作用后的人成肌细胞、增殖培养液培养后的各代人成肌细胞及仅含20 mL/L HS分化液分化形成的肌管细胞染色均为阳性; C2C12细胞β-Tubulin Ⅲ抗体染色阴性;上述所有细胞抗Neurofilament Mr 68×103和抗GFAP染色均为阴性. RT-PCR和Western Blot验证上述β-Tubulin Ⅲ染色阳性的人成肌细胞和肌管细胞中β-Tubulin Ⅲ mRNA和蛋白质分子的表达. 结论:成年人骨骼肌干细胞不能被有效诱导分化成神经细胞;并证实人源性培养的成肌细胞和肌管细胞表达β-Tubulin Ⅲ,但是不表达Neurofilament Mr 68×103. 两种蛋白神经元标志物在人成肌细胞的表达不相吻合,我们对β-Tubulin Ⅲ能否作为人体组织横向分化研究的神经元特异的标志物提出疑问.
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