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钠离子依赖的中性氨基酸转运蛋白SNAT2-HA融合蛋白的构建及鉴定

来源 :上海师范大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：DSSQWYSDD

【摘 要】

：

钠离子依赖的中性氨基酸转运蛋白SNAT2在哺乳动物组织中广泛表达，具有转运中性氨基酸的功能，在谷氨酸-谷氨酰胺循环、肝脏糖质新生等生物通路中发挥重要作用．为了方便测定SNAT2

【作 者】

：

董晓云 王函 孟雯 李洋 张舟 

【机 构】

：

上海师范大学生命与环境科学学院

【出 处】

：

上海师范大学学报：自然科学版

【发表日期】

：

2012年1期

【关键词】

：

中性氨基酸转运蛋白SNAT2 融合蛋白 构建和鉴定 sodium - coupled neutral amino acid transporter 2 （SNA 

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目（30870560）,上海市科学技术委员会项目（10540503400）,上海市教育委员会科研创新项目（09ZZ1039）,上海市重点学科建设项目（S30406）,上海师范大学细胞生物学重点学科建设项目（DZL808）

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钠离子依赖的中性氨基酸转运蛋白SNAT2在哺乳动物组织中广泛表达，具有转运中性氨基酸的功能，在谷氨酸-谷氨酰胺循环、肝脏糖质新生等生物通路中发挥重要作用．为了方便测定SNAT2在细胞膜上的表达和定位，本研究采用PCR扩增和酶切连接将HA标签蛋白与SNAT2的C末端连接，构建了真核生物表达载体pBK-CMVA（1098—1300）-SNAT2-HA表达载体．用脂质体转染法将该表达载体瞬时转染到HEK293T细胞中，通过Westernblot法检测到SNAT2-HA融合蛋白在细胞膜上的正确表达和定位．pBK-

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