【摘 要】
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利用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）方法扩增得到肠道病毒71型（EV71SHZH03）外壳蛋白VP1基因，经序列测定证实后，构建重组表达质粒VP1／pPIC9K，转化Pichiapastoris酵母宿主菌GS115，以Myc-T
【机 构】
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江汉大学医学与生命科学学院,中国疾病预防与控制中心病毒基因工程国家重点实验室,深圳市疾病预防与控制中心
【基金项目】
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湖北省科技攻关计划（2005AA301C56）.
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利用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）方法扩增得到肠道病毒71型（EV71SHZH03）外壳蛋白VP1基因，经序列测定证实后，构建重组表达质粒VP1／pPIC9K，转化Pichiapastoris酵母宿主菌GS115，以Myc-Tag多克隆抗体作为一抗，利用双层滤膜法筛选酵母转化子．甲醇诱导表达．SDS-PAGE分析显示：表达产物的分子量约为30000，与天然VP1大小一致；ELISA实验表明，表达上清液可与EV71患者急性感染期血清呈阳性反应，表明重组蛋白VP1具有免疫原性。
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