探讨长链非编码RNA Fez家族锌指蛋白1反义RNA1(lncRNA FEZF1-AS1)的表达对肝癌细胞生物学功能的影响。
方法以sh-FEZF1-AS1和OE-FEZF1-AS1转染肝癌SMMC771和BEL-7402细胞,采用实时荧光定量PCR法检测下调或上调lncRNA FEZF1-AS1后肝癌细胞中lncRNA FEZF1-AS1的表达变化。以细胞计数盒8(CCK-8)法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。采用Transwell法和划痕实验检测lncRNA FEZF1-AS1对肝癌细胞侵袭和迁移能力的影响,采用Western blot法检测肝癌细胞内黏附分子的表达水平。裸鼠移植瘤实验验证lncRNA FEZF1-AS1对肝癌生长的影响。
结果lncRNA FEZF1-AS1在肝癌细胞中的下调或上调表达能够抑制或促进肝癌细胞的增殖。CCK-8法检测结果显示,sh-FEZF1-AS1转染组SMMC7721和BEL-7402细胞的增殖能力明显减弱。第5天时,SMMC7721和BEL-7402细胞的增殖活性分别为(35.43±4.06)%和(34.68±3.97)%,与sh-NC组[分别为(52.21±8.46)%和(53.76±7.64)%]比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。OE-FEZF1-AS1转染组SMMC7721和BEL-7402细胞的增殖能力明显升高。第5天时,SMMC7721和BEL-7402细胞的增殖活性分别为(83.49±6.92)%和(80.31±3.13)%,与OE-NC组[分别为(53.03±8.84)%和(55.11±7.09)%]比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。流式细胞术检测结果显示,sh-FEZF1-AS1转染组SMMC7721细胞的凋亡率为(13.02±1.38)%,明显高于sh-NC组[(5.57±1.46)%, P<0.05]。sh-FEZF1-AS1转染组BEL-7402细胞的凋亡率为(11.88±1.29)%,明显高于sh-NC组[(8.06±1.42)%,P<0.05]。OE-FEZF1-AS1转染组SMMC7721细胞的凋亡率为(3.01±0.39)%,明显低于OE-NC组[(6.68±0.96)%,P<0.05]。OE-FEZF1-AS1转染组BEL-7402细胞的凋亡率为(3.22±0.43)%,明显低于OE-NC组(6.63±0.45)%,P<0.05]。在肝癌细胞内下调或上调lncRNA FEZF1-AS1的表达能够减弱或增强肝癌细胞的迁移和侵袭能力。抑制或增强lncRNA FEZF1-AS1的表达水平可抑制或增强肝癌细胞中黏附分子的表达。经过30 d同等条件喂养后,对切除的裸鼠移植瘤进行测量,sh-FEZF1-AS1组和sh-NC组SMMC7721细胞移植瘤的肿瘤体积分别为(0.26±0.03)cm3和(0.63±0.06)cm3,差异有统计学意义(P<0.05);sh-FEZF1-AS1组和sh-NC组BEL-7402细胞移植瘤的肿瘤体积分别为(0.31±0.02)cm3和(0.72±0.08)cm3,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论lncRNA FEZF1-AS1可促进肝癌细胞的生长、迁移和侵袭。