【摘 要】
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目的 量化AIF基因在细胞能量代谢中的功能特性,探讨该基因相关听神经病的分子致病机制。方法 选择第三代基因编辑工具CRISPR-Cas9技术结合阳离子脂质体转染技术,快速实现对HE
【机 构】
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解放军总医院解放军医学院耳鼻咽喉头颈外科解放军耳鼻咽喉研究所
【基金项目】
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国家重大科学研究计划项目(2014CB943001),国家自然基金重大国际合作项目(81120108009)及全军“十二五”重点项H(BWS11J026)联合资助
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目的 量化AIF基因在细胞能量代谢中的功能特性,探讨该基因相关听神经病的分子致病机制。方法 选择第三代基因编辑工具CRISPR-Cas9技术结合阳离子脂质体转染技术,快速实现对HELA细胞的AIF基因进行敲除,并通过Western blot进行蛋白表达分析,Sanger测序进行基因型的分析,然后利用Oxygraph-2K对多个AIF基因敲除细胞系以及野生型细胞系进行氧化供能的检测,最后采用Graph Pad prism5.00进行数据分析。结果 通过该方法获得了多株AIF基因敲除细胞系,并发现野生型细胞系
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