【摘 要】
：
目的 构建一个以乙肝核心抗原为骨架的病毒样颗粒,乙肝表面抗原＂a＂决定簇呈现在该病毒样颗粒的表面.方法 乙肝adr血清型的HBsAg蛋白＂a＂抗原决定簇（aa139～148,CSKPTDGNCT）插入到HBcAg的第78位天冬氨酸和第79位脯氨酸之间,密码子优化之后基因合成,酶切后连接到表达载体上,在大肠埃希菌中进行表达,纯化后对蛋白进行电镜观察、ELISA检测抗原性、免疫兔后检测免疫原性.结果
【机 构】
：
中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,北京102206,北京出入境检验检疫局保健中心,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,北京102206,新疆农业大学,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,北京1
论文部分内容阅读
目的 构建一个以乙肝核心抗原为骨架的病毒样颗粒,乙肝表面抗原＂a＂决定簇呈现在该病毒样颗粒的表面.方法 乙肝adr血清型的HBsAg蛋白＂a＂抗原决定簇（aa139～148,CSKPTDGNCT）插入到HBcAg的第78位天冬氨酸和第79位脯氨酸之间,密码子优化之后基因合成,酶切后连接到表达载体上,在大肠埃希菌中进行表达,纯化后对蛋白进行电镜观察、ELISA检测抗原性、免疫兔后检测免疫原性.结果 构建得到预期的原核表达质粒,并在大肠埃希菌中表达,纯化后电镜观察为病毒样颗粒,ELISA检测证实具有良好的抗原性和免疫原性.结论 成功获得预期的带乙肝表面抗原＂a＂决定簇的病毒样颗粒,为其应用奠定基础。
其他文献
目的 调查广西壮族自治区孕妇、患病新生儿、肾病患者、肾移植患者及正常体检者尿中人巨细胞病毒阳性率,了解人类巨细胞病毒在广西不同人群中的分布情况,初步探讨人巨细胞病毒感染与肾脏疾病的关系.方法 用荧光定量PCR检测研究对象晨尿中人巨细胞病毒DNA.结果 孕妇、患病新生儿、肾病者、肾移植患者及正常体检者尿中人巨细胞病毒DNA阳性率依次为8.18%、3.45%、18.54%、25.42%、0.56%,其
目的 探讨人类白细胞抗原(HLA)的DRB1*1301,1302基因与乙型肝炎肝硬化的关系.方法 采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)对27例乙型肝炎肝硬化和30例慢性乙型肝炎患者进行HLA-DRB1*1301,1302的检测.结果 HLA-DRB1*1301,1302在乙型肝炎肝硬化组高于慢性乙型肝炎组(29.6%vs10.0%,χ2=5.900,P<0.05,RR=5.294),差
目的 研究在单一时间点上的人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA检测及HC2-HPV-DNA检测在宫颈疾病筛查中的应用.方法 对2008年1月至2009年7月就诊的130例患者进行HPV E6/E7 mRNA与HC2-HPV-DNA检测.以TCT结果为标准评价两种方法检测宫颈高度病变的效能.结果 HC2-HPV-DNA检测阳性检出率82.3%(107/130),HPV E6/E7 mRNA检测
目的 观察补体调节蛋白CD59在HIV感染者外周血T细胞上的表达情况,并进一步探讨高效抗逆转录病毒治疗(Highly Active Antiretroviral Therapy,HARRT)前后CD59在外周血T细胞上的表达变化及其意义.方法 收集48例确诊HIV感染者外周血,根据是否HARRT分为未治疗组(23例)及治疗组(25例),并收集14例健康志愿者外周血,全血细胞表面染色后使用BD FA
目的 了解北京地区成人发热就诊患者中人冠状病毒HCoV-229E感染病原学、临床表现和流行病学特点.方法 2007年10月至12月从北京地区发热且有呼吸道症状的就诊成人中采集158份鼻咽拭子标本,利用荧光定量RT-PCR法进行HCoV-229E筛查;利用常规PCR方法扩增HCoV-229E基因片段测序;对感染阳性患者进行HCoV-NL63、HCoV-HKU1及HMPV的共感染筛查、临床表现描述和流
目的 探讨慢性乙型肝炎患者血清白细胞介素-17(IL-17)水平变化及其在慢性肝炎肝损伤中的意义.方法 采用ELISA方法检测42例慢性轻度乙肝患者、37例慢性中度乙肝患者、38例慢性重度乙肝患者及50例正常对者血清IL-17浓度,采用放射免疫方法测定血清IL-6、IL-8浓度.结果 IL-17、IL-6、IL-8水平在各组乙肝患者血清中均高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01),慢性轻度
目的 研究慢性乙型肝炎患者α-干扰素(IFN-α)中和抗体(NA)产生的情况,并探讨其对IFN抗病毒疗效的影响.方法 采用抗病毒中和生物测定法检测了48例慢性乙型肝炎患者IFN-α治疗前、治疗后3-6个月血清中NA产生的情况;同时,也检测了10名健康人血清中NA.结果 慢性乙型肝炎患者IFN-α治疗前和健康人血清中均无NA产生.48例患者IFN-α治疗6个月后,完全应答有15例,部分应答23例,无
目的 比较分析单纯急性戊型肝炎与重叠感染患者的肝功能指标和临床特点.方法 以40例单纯急性戊型肝炎为对照,回顾性分析了122例重叠感染戊型肝炎患者的肝功能指标、临床资料.结果 单纯戊肝组、甲戊重叠感染组、乙戊重叠感染组,三组之间ALT、AST、TBIL、DBIL差异均无统计学意义(P0.05),急性戊肝组与乙戊重叠感染组,甲戊重叠感染组与乙戊重叠感染组的白蛋白、球蛋白有统计学差异(P<0.01);
树突状细胞(dendritic cells.DC)作为体内最重要的抗原提呈细胞(antigen presenting cells,APC).也是唯一能激活初始型T细胞(naive T eel)的抗原呈递细胞,在慢性乙型肝炎免疫发病机制中起重要作用.研究认为,DC数量的减少和功能的缺陷是造成慢性乙型肝炎患者体内缺乏有效的病毒特异性CD8+CTL应答的重要原因,也是造成病毒持续感染的关键原因。
目的 了解慢性乙型肝炎(慢性乙肝)患者血清趋化因子RANTES水平,探讨血清RANTES水平与丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素(TBil)、凝血酶原活动度(PTA)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)及乙型肝炎病毒(HBV DNA)载量的相关性.方法 选择144例慢性乙肝患者(观察组)和18名健康人(对照组),采取静脉血并应用ABC-ELISA方法 检测其血清中趋化因子RANT