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目的 探讨生殖细胞核因子(GCNF)在大鼠附睾中的时空表达与分布.方法应用免疫组化和蛋白质免疫印迹技术,检测GCNF蛋白在出生后7、14、28、45、60、90天龄和18月龄大鼠附睾内的表达、定位和发育变化,并通过凝胶成像及图像分析系统对实验结果进行统计学分析.结果GCNF表达于出生后14天龄至18月龄大鼠附睾上皮的细胞核内,其表达呈明显的年龄相关性和附睾区段以及细胞特异性.14天龄附睾上皮内出现散在的阳性细胞核,28天龄时阳性细胞数和阳性强度明显增强,45天龄时达到高峰.成年后阳性细胞数维持不变而阳性染色强度开始逐渐减弱,18月龄时减弱非常明显.附睾管上皮内的各种细胞如主细胞、基细胞、顶细胞、狭窄细胞和亮细胞等均呈GCNF阳性染色,从附睾起始段到尾段均有阳性染色,其中以近端头部最强;远端尾部主细胞核阳性减弱非常明显甚至呈阴性,而亮细胞核则阳性较强.14 d后各年龄组附睾抽提物中均可见55 000处有GCNF特异性条带,其年龄变化与免疫组化结果一致.结论GCNF在大鼠附睾上皮内的表达与附睾上皮分化和发育过程明显相关,且其分布表现出明显的附睾区段和细胞特异性。