【摘 要】
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目的:研究腺相关病毒载体(AAV)感染各类正常细胞和肿瘤细胞的效率,为相关研究提供参考。方法:利用脂质体将重组腺相关病毒的包装质粒AAV-DJ、Helper以及表达绿色荧光蛋白(GFP
【机 构】
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辽宁医学院第二炮兵总医院研究生培养基地,第二炮兵总医院,解放军第307医院胸外科,中国疾病预防控制中心辐射防护与核医学安全所辐射防护与核应急中国疾病预防控制中心重点实验室
【基金项目】
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国家自然基金科学部主任基金(31340051)“腺病毒Ad-pig3RRP-PIAS3对辐射诱导肺腺癌细胞转移的抑制作用及其机制研究”;国家自然科学基金青年科学基金(81202151)“低剂量辐射对树突状细胞迁移能力的影响及其分子机制研究”;国家自然科学基金青年科学基金(81001216)“NOK激酶促进肿瘤细胞周期进程及提高肿瘤细胞辐射敏感性分子机制研究”;全军医学科技“十二五”科研项目(C
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目的:研究腺相关病毒载体(AAV)感染各类正常细胞和肿瘤细胞的效率,为相关研究提供参考。方法:利用脂质体将重组腺相关病毒的包装质粒AAV-DJ、Helper以及表达绿色荧光蛋白(GFP)的穿梭质粒AAV-GFPP转染293FT细胞进行病毒包装,收集病毒液后感染2种正常细胞和14种肿瘤细胞,24 h后倒置荧光显微镜下观察GFP的表达,并随机选取3个视野统计感染GFP的细胞数目。结果:GFP重组腺相关病毒对各种细胞的感染效率存在差别,感染效率最高的为293FT细胞(占96.2%)和Hela细胞(占81.86%),对SCG7901、SEM-M和SP20细胞的感染效率近乎为零。结论:GFP重组腺相关病毒对正常细胞293FT感染效率最高,对肿瘤细胞Hela、SMC7721、BGC823、PANC-1、A549、A875、C6和MCF-7的感染效率较高,这类细胞适合使用AAV作为载体进行外源基因的导入及功能研究。
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