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目的构建小鼠胆盐依赖脂肪酶(BSDL)重组蛋白的大肠埃希菌原核表达载体,制备具有生物学活性的小鼠BSDL蛋白。方法首先应用PCR合成m BSDL的cDNA序列,克隆至原核表达载体p ET-28b,转化大肠埃希菌表达菌种BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导重组蛋白表达。使用His Trap FF crude柱纯化重组m BSDL蛋白。Western blot鉴定后采用尿素浓度梯度降低法进行透析复性。结果成功构建原核表达载体pET-28b-m BSDL,实现该蛋白在E.coli BL21(DE3)表达菌