正交设计优化山茱萸ISSR-PCR反应体系研究

来源 :陕西师范大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:reemchan
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利用正交试验设计法,从引物浓度、TaqDNA聚合酶浓度、Mg^2+浓度和dNTP浓度4种因素3个水平,对山茱萸ISSR—PCR反应体系进行优化分析,并在此基础上对模板DNA浓度、PCR反应过程中的退火温度进行梯度检测.结果表明,20弘LISSR—PCR反应体系中各因素的最佳浓度分别为:1×PC Rbuffer、150μmol/LdNTP、1.0μmaol/L引物、2.5mmol/L Mg^2+和2.0U TaqDNA聚合酶,最佳模板DNA浓度为20-80ng,引物UBC835的最佳退火温度为57
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