【摘 要】
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目的: 制备抗O型口蹄疫病毒(FMDV)衣壳蛋白VP1的单克隆抗体(mAb)并进行特性鉴定.方法: 以自行构建表达的O型FMDV-VP1表位重组蛋白(VP1epi)为抗原免疫BALB/c小鼠, 按常规方法
【机 构】
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吉林大学基础医学院免疫学教研室,吉林大学基础医学院分子生物学教研室
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目的: 制备抗O型口蹄疫病毒(FMDV)衣壳蛋白VP1的单克隆抗体(mAb)并进行特性鉴定.方法: 以自行构建表达的O型FMDV-VP1表位重组蛋白(VP1epi)为抗原免疫BALB/c小鼠, 按常规方法进行细胞融合.采用有限稀释法和间接ELISA法克隆和筛选阳性杂交瘤细胞株, 用Western blot、间接ELISA和斑点免疫测定法对mAb的特异性进行鉴定.结果: 成功地获得1 株分泌抗VP1epi重组蛋白mAb的杂交瘤细胞株"C7", 其分泌的mAb为IgG1亚类, 能特异性地识别VP1epi重组蛋白, 其腹水效价可达1∶ 12 800.斑点免疫测定法显示, 该mAb能很好地识别灭活的FMDV.结论: VP1epi重组蛋白可代替FMDV制备抗天然FMDV-VP1的mAb.抗O型FMDV-VP1 mAb的成功制备, 为进一步研究开发新型FMDV的检测方法奠定了基础.
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