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目的
建立19A型肺炎链球菌多糖(Streptococcus pneumoniae type 19A polysaccharide,19APS)结合物中游离PS含量的测定方法。
方法在一定条件下分别用1、3和5 g/L脱氧胆酸钠(sodium deoxycholate,DOC)溶液(pH7.3)沉淀不同浓度的破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT),确定不同浓度DOC沉淀载体蛋白TT的浓度范围。以1 g/L DOC分离结合19APS(19APS-TT)和游离19APS,测定上清液中的游离PS含量,并验证该DOC沉淀法的准确度和精密度。
结果分别以1和3 g/L DOC沉淀19APS-TT时,TT浓度最好分别控制在﹤150和﹤200 μg/ml。该DOC沉淀法的准确度和精密度均良好,加标PS回收率为94.0%~107.2%,相对标准偏差均﹤4%。
结论成功建立了19APS-TT中游离PS含量的测定方法。