人端粒结合蛋白TRF1的克隆、表达和抗体制备

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wangqiang1818

【摘要】

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利用RT-PCR技术，从HeLa细胞的cDNA文库中扩增到人端粒结合蛋白1(hTRF1)基因编码区序列，克隆至pUCm-T载体，测序正确后，构建带His6-tag原核表达载体pET-28c-TRF1，经IPTG诱导表达的Hi

【作者】

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江红郑晓飞罗瑛朱捷付汉江孙强玲陈长浩孙志贤

【机构】

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军事医学科学院放射医学研究所

【出处】

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生物工程学报

【发表日期】

：

2004年1期

【关键词】

：

人端粒结合蛋白l 原核表达抗体克隆 telomeric repeat binding factor1 (TRF1) expression polyclo

【基金项目】

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国家自然科学基金资助项目 (No .3 0 0 0 0 0 86和 3 0 0 0 0 195 )~~

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利用RT-PCR技术，从HeLa细胞的cDNA文库中扩增到人端粒结合蛋白1(hTRF1)基因编码区序列，克隆至pUCm-T载体，测序正确后，构建带His6-tag原核表达载体pET-28c-TRF1，经IPTG诱导表达的His6-TRF1融合蛋白分子量约为65kD,Western-blot，证实表达产物可特异地与。FRF1抗体sc-6165结合。用Ni^2+-NTA胶亲和层析纯化可得到电泳均一的融合蛋白，免疫新西兰纯种大白兔，获得特异性好的多克隆抗体，该抗体可用于免疫荧光染色和Western-blot方法

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