【摘 要】
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目的 探索PEG-PEI/ROCK-Ⅱ-siRNA复合物的物理性能及转染C17.2神经干细胞的效率.方法 设计合成PEG-PEI共聚物基因载体,与ROCK-Ⅱ-siRNA进行复合;用凝胶阻滞电泳实验、粒径与
【机 构】
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中山大学孙逸仙纪念医院神经内科,中山大学化学与化学工程学院,中山大学中山医学院
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目的 探索PEG-PEI/ROCK-Ⅱ-siRNA复合物的物理性能及转染C17.2神经干细胞的效率.方法 设计合成PEG-PEI共聚物基因载体,与ROCK-Ⅱ-siRNA进行复合;用凝胶阻滞电泳实验、粒径与电位的测定观察PEG-PEI/ROCK-Ⅱ-siRNA复合物的复合效果;采用透射电镜观察PEG-PEI/ROCK-Ⅱ-siRNA复合物的形态学;通过流式细胞仪技术定量检测复合物对C17.2神经干细胞的转染效果.结果 PEG-PEI/ROCK-Ⅱ-siRNA复合物在N/P=10时完全复合.随着N/P比的增大,复合物的粒径变小而电位增大.在N/P=50时,透射电镜观察到复合物为球形,很好的分散性,平均粒径约为100 nm.PEG-PEI/ROCK-Ⅱ-siRNA复合物在N/P=50时转染C17.2神经干细胞的转染效率最高,为(70.24±5.21)%.结论 PEG-PEI基因载体可以很好的与ROCK-Ⅱ-siRNA复合.PEG-PEI/ROCK-Ⅱ-siRNA复合物对于C17.2神经干细胞具有良好的转染效率.
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