探讨Rnd3在胶质瘤细胞凋亡中的作用及机制。
方法通过Myc-Rnd3真核表达质粒转染，以Myc真核表达质粒转染作为对照，调控胶质瘤细胞株U251中Rnd3的表达；采用流式细胞术检测转染后U251细胞凋亡率；用Western blot技术检测细胞内Rnd3、p65、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)以及裂解的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved-Caspase-3)的表达；以Flag真核表达质粒转染作为对照，通过Flag-p65真核表达质粒转染恢复p65表达后，用Western blot技术检测其下游bcl-2以及cleaved-Caspase-3蛋白的表达；Myc-Rnd3转染后，用MG-132抑制蛋白泛素化，检测细胞内p65蛋白表达。
结果经真核表达质粒转染后，Myc-Rnd3组细胞Rnd3蛋白表达量较Myc组显著提高(P<0.05)；Myc-Rnd3组细胞凋亡由U251-Myc组7.28%(5.36±0.1、1.92±0.12)增加至U251-Myc-Rnd3组的19.93%(13.51±0.32、6.42±0.21)，细胞凋亡率明显高于Myc组，差异有统计学意义(P<0.05)；与U251-Myc组比较，U251-Myc-Rnd3组p65蛋白表达量降低，高表达的Rnd3使p65表达下调，进而引起bcl-2下调和cleaved-Caspase-3上调，差异有统计学意义(P<0.05)；逆转p65蛋白功能后(p65＋，Rnd3－)组较(p65－，Rnd3－)组p65表达量升高(P<0.05)，bcl-2表达量升高(P<0.05)，cleaved-Caspase-3表达量降低(P<0.05)；(p65＋，Rnd3＋)组较(p65＋，Rnd3－)组p65表达量差异无统计学意义；(p65－，Rnd3＋)组较(p65－，Rnd3－)Rnd3表达量升高(P<0.05)，p65表达量降低(P<0.05)，bcl-2表达量降低(P<0.05)，cleaved-Caspase-3表达量升高(P<0.05)；MG-132抑制细胞内蛋白泛素化途径结果显示，随着Rnd3蛋白表达量升高，p65蛋白表达量依次降低；而在MG-132处理组，随着Rnd3蛋白表达量升高，p65蛋白表达量差异无统计学意义。
结论Rnd3可能通过促进p65泛素化诱导U251胶质瘤细胞凋亡。