一种抗菌肽和aFGF融合蛋白的构建和表达

来源 :中国生物工程杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ciscohd
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利用PCR技术扩增出带有凝血酶Xa因子切割位点的天蚕素蜂毒素杂合肽和aFGF的融合基因,插入大肠杆菌表达载体pET-3c中,构建出表达质粒pET-aF-CM,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,氨苄青霉素抗性筛选重组转化子。踟诱导4h后,以包涵体形式表达的融合蛋白约占菌体总蛋白的17%。将包涵体溶解后透析复性,并利用肝素亲和层析纯化,得到电泳纯的融合蛋白。Western blot分析表明,该蛋白能与aFGF抗体产生免疫反应。MIT法检测显示,融合蛋白具有促3,13BaL/b细胞分裂活性,其比活为1.47
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