【摘 要】
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本研究旨在通过茎一环RT-PCR法，建立有效定量miRNA421的PCR方法，探讨该方法在定量检测miRNA方面的应用价值．利用miRBase数据库获得miRNA-421的成熟序列．设计3条miRNA421特异性反
【机 构】
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南京师范大学生命科学学院分子细胞生物学研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金（81171913）、2008年江苏省教育厅重大项目（08KJA520001）.
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本研究旨在通过茎一环RT-PCR法，建立有效定量miRNA421的PCR方法，探讨该方法在定量检测miRNA方面的应用价值．利用miRBase数据库获得miRNA-421的成熟序列．设计3条miRNA421特异性反转录引物，Q—PCR上游引物及通用下游引物．通过10倍梯度稀释RNA后特异性反转录，RT—PCR分析不同引物互相配对PCR的扩增曲线及熔融曲线，鉴定出特异性好、扩增效率高的引物．为进一步鉴定引物的有效性，过表达miRNA-d21，用鉴定的成熟引物定量扩增．利用茎一环RT—PCR法设计、鉴定出mi
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