目的建立同时测定新生儿脐带血和产妇外周静脉血中罗哌卡因和舒芬太尼的超高效液相串联质谱法（UPLC-MS/MS）分析方法。方法血浆样品以布比卡因为内标,采用乙酸乙酯与乙醚（1:1,V/V）进行液-液萃取。采用Waters BEH C₁₈柱（2.1mm×50mm,1.7μm）色谱柱,以0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水进行梯度洗脱,流速为0.35 mL·min^-1,柱温为45℃;质谱条件采用ESI离子源,检测方式为正离子源,多反应离子监测模式（MRM）,用于定量分析的离子反应分别为m/z 275.2→m/z126.0（罗哌卡因）,m/z 387.1→m/z 238.1（舒芬太尼）。结果罗哌卡因和舒芬太尼分别在0.25²02.0 ng·mL^-1、0.165¹33.6 ng·mL^-1内线性关系良好（r²>0.995）。罗哌卡因的高、中、低浓度(202、50.5、2.5 ng·mL^-1)样本方法的平均回收率在78.46%以上,日内、日间精密度均小于8.04%。舒芬太尼的高、中、低浓度(133.6、33.4、1.65 ng·mL^-1)样本方法的平均回收率在71.62%以上,日内、日间精密度均小于13.86%。结论所建立的分析方法简单、快速、准确、灵敏可用于临床上监测舒芬太尼和罗哌卡因的血药浓度。