蒙古沙冬青AmDREB2.2基因的克隆与植物表达载体构建

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从前期建立的蒙古沙冬青[Ammopiptanthus mongolicus(Masxim)Cheng f.]根转录本数据库中克隆得到1个编码DREB类转录因子基因。结果表明,Am DREB2.2基因序列全长1 045 bp,开放阅读框(ORF)为597 bp,编码198个氨基酸,具有典型的DREB转录因子保守的AP2结构域。实时荧光定量PCR分析表明,该基因能在根、叶中表达,但对干旱、低温响应不同,Am DREB2.2主要参与根的干旱胁迫应答。在Am DREB2.2基因的编码区两端分别加入Bam HⅠ和SacⅠ酶切位点,双酶切植物表达载体p PZP212和带有酶切位点的Am DREB2.2基因PCR产物,成功获得了Am DREB2.2的植物过表达载体p PZP212-Am DREB2.2。
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