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摘要目的：研究肠愈宁颗粒对二硝基氯苯乙酸复合法诱导大鼠溃疡性结肠炎的作用，并初步探讨其作用机制。方法：将雄性SD大鼠分成6组：正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶组（SASP）和肠愈宁颗粒低、中、高剂量组。以二硝基氯苯乙酸复合法诱导大鼠溃疡性结肠炎模型。评估疾病活动指数（DAI）、结肠黏膜损伤指数（CMDI）和病理组织学。ELISA方法测定血清ILβ、TNFα、钙卫蛋白（Calproteein，CP），Western blot方法检测结肠黏膜CP的表达水平。结果：DAI结果提示造模成功，与正常组比较，模型组血清中ILβ、TNFα、CP均明显升高，而CMDI指数、结肠黏膜CP均明显升高。肠愈宁颗粒各组DAI、CMDI、结肠组织中黏膜CP均降低，血清中ILβ、TNFα、CP水平也明显降低。结论：肠愈宁颗粒能够有效缓解二硝基氯苯乙酸复合法诱导的大鼠溃疡性结肠炎，其作用机制可能与下调ILβ、TNFα表达，减少CP水平有关。
关键词肠愈宁；溃疡性结肠炎；ILβ；TNFα；CP
Effects of Changyuning on Inflammatory Factors and the Release of Calprotectin in Rats with Ulcerative Colitis
Wang Haiqiang1，Zheng Lihong2，Zhu Feng3，Liu Zhaoxia1，Wang Jingbin1，Zhang Yang1，Liang Guoying1，Liu Jindi3，Zhang Yuetao3
（1 The First Affiliated Hospital of Heilongjiang University of Traditional Chinese Medicine，Harbin 150040，China； 2 The Second Affiliated Hospital of Heilongjiang University of Traditional Chinese Medicine，Harbin 150001，China； 3 Heilongjiang University of Traditional Chinese Medicine，Harbin 150040，China）
AbstractObjective：To study the effects of Changyuning Granule （CYN） on ulcerative colitis induced by dinitrochlorobenzene/ethanoic acid in rats，and to explore its mechanism.Methods：Male SD rats were divided into 6 groups：the normal group，the model group，the low，medium and high dose group of CYN and the sulfonylamine group （SASP）.The ulcerative colitis model was induced by dinitrochlorobenzene/ethanoic acid.Disease activity index （DAI），colonic mucosa damage index （CMDI） and pathological histology were assessed.Serum ILβ，TNFα，and calcium protein （Calproteein，CP） were detected by ELISA.The expression of CP in colonic mucosa was detected by Western blot.Results：DAI results suggested that the model was successful.Compared with the normal group，ILβ，TNFα，and CP in the serum of the model group were significantly increased，and the index of CMDI，colonic mucosa CP were significantly increased.The DAI，CMDI，and mucosal CP in the colon tissue of each group of Changyuning Granules were decreased，and the levels of IL，TNF，and CP in serum were also significantly decreased.Conclusion：CYN Granule can effectively relieve the ulcerative colitis induced by dinitrochlorobenzene/ethanoic acid in rats.The mechanism may be related to downregulation of ILβ and TNFα expression and reduction of CP level.
Key WordsChangyuning； Ulcerative Colitis； ILβ； TNFα； CP
中图分类号：R2855文献标识码：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2018.10.045
溃疡性结肠炎（Ulcerative Colitis，UC）属于炎症性肠病之一，其发病机制尚不明確，临床症状表现为腹痛、腹泻、里急后重、黏液脓血便等[1]。目前，临床上治疗UC主要以糖皮质激素和水杨酸制剂为主，代表药有柳氮磺胺吡啶和美沙拉嗪，但是不良反应大，无法长期服用。现代医学研究表明，免疫失衡在UC发生过程中起关键作用，过度活化的效应细胞产生的抗体、炎性反应介质、细胞因子引起炎性病变导致组织破坏[2]。二硝基氯苯模型是一个典型的胃肠道迟发变态反应模型，其原理为长期存在的外源性抗原或机体自身抗原激活机体的免疫系统，产生细胞免疫反应，直接诱发或加重UC[3]。 本科室经历了近10多年的临床和实验课题研究，在方法中归纳出清热解毒，健脾燥湿法治疗本病，并经过反复摸索研制出经验方剂肠愈宁颗粒，在临床实践中肠愈宁颗粒治疗UC取得了良好的疗效，而且其安全性良好。本实验用DNBS诱导SD大鼠UC模型，研究UC大鼠在肠愈宁颗粒干预下CP在结肠黏膜、血清中的表达的变化和差异，同时结合相关炎性介质进一步阐明肠愈宁颗粒对UC进行有效的阻断和治疗，并提供科学的理论依据
1材料与方法
11材料
111动物清洁级SD大鼠60只，均为雄性，体重（250±15）g，由黑龙江中医药大学动物实验中心提供。实验动物许可证号：SCXK（黑）20140003。
112药物2、4二硝基氯苯（DNCB）：由上海安诺方胺化学品公司生产。肠愈宁颗粒（白头翁，黄连，黄零，赤石脂，焦白术等）组成。由江苏天阴药业生产。柳氮磺胺吡啶（SASP）（上海三维制药有限公司，生产批号：07051）。用前研碎，用生理盐水配置成混悬液。
113试剂与仪器VICTOR X3酶标仪，美国PerkinElmer公司；BI496 2000医学图像分析系统，成都泰盟科技有限公司；BT 25S型电子分析天平，德国Sartorius公司；HWS24恒温水浴锅，上海一恒科学仪器有限公司；电泳仪，上海精密仪器仪表有限公司，高速台式离心机，科大创新股份有限公司，凝胶成像分析系统。OMLQPA型生物组织切片机，湖北欧美莱医疗科技有限责任公司。
12方法
121分组与模型制备采用二硝基氯苯乙酸复合法制备大鼠UC模型。将60只SD大鼠随机分成实验组50只和正常组10只。实验组大鼠背部剃毛后，用2% 2，4二硝基氯苯丙酮溶液滴背部，1次/d，每只鼠5滴/次，连续14 d致敏。15 d向肛内约6 cm处的结肠腔内用1% 2，4二硝基氯苯乙醇液保留灌肠035 mL，于16 d在同部位注入01%乙酸溶液2 mL，准确计时15 s后，再用50 mL生理盐水冲洗。造模前后均给予大鼠高脂饮食。17 d随机抽取2只造模大鼠处死，取其结肠标本，病理检查确认有充血，水肿及典型溃疡形成即为造模成功。
122给药方法各观察组均于造模后1 d给予相应药物灌胃，连续两周。在建立UC病变动物模型的同时，肠愈宁高剂量组、中剂量组、低剂量组（CYNL，CYNM，CYNG）分别灌服相当于生药量为1 g/mL、2 g/mL、4 g/mL的肠愈宁顆粒溶液10 mL/（kg·d）。柳氮磺胺吡啶对照组（SASP）：灌服相当于生药量为02 g/（kg·d）柳氮磺胺吡啶悬浊液10 mL/（kg·d），药物均溶于质量分数为05% CMC溶液，超声溶解。而空白对照组、模型对照组给予等量生理盐水灌胃10 mL/（kg·d），在第31天处死大鼠并取材。
123检测指标与方法疾病活动指数（Disease Activity Index，DAI）参考文献[4]的方法，分别观察大鼠体重、大便性状及血便变化，具体计分标准见表1。
3讨论
目前，对于UC西药尚缺乏强有效的干预手段，UC的西药治疗如美沙拉嗪、4氨基水杨酸等虽对病情有所控制，不良反应较大。其次是皮质类固醇，是临床治疗急性暴发型和重度溃结患者的首选药物，长期应用易产生不良反应且不能防止复发。再次是免疫抑制剂，对常规药物治疗无效的UC有一定疗效，但对肝、肾及骨髓有毒性[6]。而中医药治疗溃结体现了较明显的优势，近些年中医药治疗溃结疗效显著，却无明显不良反应，体现出中药治疗溃结的优越性。我们经过近20余年的临床和实验研究总结出经验方肠愈宁颗粒。肠愈宁颗粒组方源自金元医家刘完素的名方白术黄芪汤（《素问病机气宜保命集·泻痢论》），结合我科名中医治疗UC的临床经验配药而成，在临床应用取得了良好的效果，有效率达90%以上，而且安全性良好[7]。本研究复制了的UC大鼠模型，并通过宏观和微观角度考察了UC大鼠肠道炎性反应，实验结果显示，肠愈宁颗粒调节了肠道异常免疫反应，使肠黏膜炎性反应和溃疡基本消除。佐证了肠愈宁颗粒的有效性。
UC病因和病机尚不明确，但免疫异常被公认为在炎症性肠病（Inflammatory Bowel Disease，IBD）中发挥着决定性的作用，包括细胞因子、炎性反应递质以及免疫调节等方面[8]。溃结与结肠癌的发生存在一定的因果关系，所以被WHO列为难治之病[9]。细胞因子可分为抗炎性细胞因子和促炎性细胞因子两类，正常人群中两类因子处于平衡状态，有研究表明，当抗炎性细胞因子异常减少或促炎性细胞因子异常增多可导致二者平衡被打破，进而促使肠道黏膜炎性反应的发生[10]
肿瘤坏死因子（Tumor Necrosis Factor，TNF）TNFα不仅具有抗肿瘤的活性，并且还能介导和调节机体的免疫反应、炎性反应、代谢等。TNFα通过促进内皮细胞粘附分子上调、趋化中性粒细胞发挥凝血酶原效应的作用，进而参与UC的发生，活动期UC，在血浆和粪便中均能检测到TNFα的表达，且水平升高[11]。IL1β属内分泌型细胞因子，可由多种细胞产生，如巨噬细胞、单核、内皮细胞和中性粒细胞等。在免疫炎性反应中有重要作用。IL1β具有较多的生物学活性，可以诱导淋巴因子的产生，活化T细胞、诱导急性期炎性反应免疫、蛋白质合成等。UC活动期IL1β的表达上调，间接提示它对UC的发病起重要作用。
钙卫蛋白（Calproteetin，CP）是一种杂合性的钙结合蛋白，来源于中性粒细胞和活化巨嗜細胞胞质，可作为一种炎性标志物。其具有抗蛋白酶活性和耐热性，在外界环境中和肠腔可长期保持稳定而不被细菌和酶破坏，其主要生物学功能包括抗微生物活性、调节免疫作用、参与细胞信号传递、抗增殖和诱导细胞凋亡、炎性反应中调节蛋白等[12]。国外研究表明钙卫蛋白的稳定性要好于以前的生物标记物，其浓度在UC活动期显著增加[13]。UC的研究，是目前免疫疾病防治研究的重点，依然存在着许多未解决的问题。钙卫蛋白作为调节蛋白在UC的防治中的相关研究极少。 本实验通过免疫印迹检测（Western blot）结肠组织CP，同时酶联免疫法（Euzy Melinked Immunosorbent Assay，ELISA）检查相关炎性介质TNFα、IL1β。结果表明模型组大鼠TNFα、IL1β的表达明显高于空白对照组，说明促炎细胞因子参与了UC的发病。经过肠愈宁颗粒治疗两周后，实验大鼠血清IL1β、TNFα的表达较模型组显著减少。表明肠愈宁颗粒治疗UC的机制可能是通过抑制促炎因子IL1β、TNFα的表达，进而调整了促炎因子与抗炎因子的平衡。此外，在血清和肠组织中，肠愈宁颗粒组的CP的含量比较模型组有显著的降低。本研究从细胞免疫和CP调节角度阐述肠愈宁颗粒影响UC的发病机制。本文可以为进一步研究肠愈宁颗粒治疗UC的机制以及UC药物的开发提供理论依据。
参考文献
[1]何小华，陈建勇.炎症性肠病发病的相关免疫机制[J].南昌大学学报：医学版，2011，51（10）：9395.
[2]路晓红，杨恩来，赵霞，等.溃疡性结肠炎免疫机制的研究进展[J].山西中医学院学报，2011，12（1）：6668.
[3]朱毅，趙锦，陈国彪，等.海南砂仁挥发油对2，4二硝基氯苯与乙酸诱发的大鼠溃疡性结肠炎的治疗作用[J].中国药理学与毒理学杂志，2009，23（5）：388394.
[4]王坤，宣秀敏，王莲，等.溃疡性结肠炎大鼠外周血CD4+CD25+Treg的变化及相关性研究[J].安徽医科大学学报，2012，47（3）：354356.
[5]Christine C，Michel C，Lecannu G.The prebiotic characteristics of fructooligo saccharides are necessary for reduction of TNBS induced colitis in rats [J].J Nutr，2003，133（1）：2127.
[6]郑家驹.炎症性肠病的维持缓解治疗[J].中华消化杂志，2007，27（12）：852854.
[7]谢晶日，林静.肠愈宁颗粒治疗溃疡性结肠炎临床疗效观察[J].中国中西医结合消化杂志，2010，18（3）：161.
[8]赵曼，高峰.溃疡性结肠炎发病机制研究进展[J].现代医学生物进展，2011，11（16）：170.
[9]Nguyen GC，TuskeyA，DassopoulosT，etal.Rising hospitalization rates for inflammatory bowel disease in the United States between 1998 and 2004[J].Inflammatory bowel diseases，2007，13：15291535.
[10]Brun JG，Haga HJ，Boe E，et al.Calprotectin in patient s with rheumat oid art hritis：relation toclinical and laboratory variables of disease activity[J].J Rheumatol，1992，19（6）：859862.
[11]王伟宁，张熙纯，刘丽.活动期溃疡性结肠炎发病机制的免疫学讨论[J].中国现代医学杂志，2003，13（16）：74.
[12]王少东，汪芳裕，万海军，等，钙卫蛋白监测在炎症性肠病患者中的意义[J].胃肠病学和肝病学杂志，2010，19（11）：10431044.
[13]Lv H，Hao SY，Yan NB.Faecal calprotectin meaning differential diagnosis among inflammatory bowel disease，irritable bowel syndrome colorectal cancer[J].Int J Lab Med，2012，33（21）：26512652.
（2018-08-14收稿责任编辑：徐颖）
关键词肠愈宁；溃疡性结肠炎；ILβ；TNFα；CP
Effects of Changyuning on Inflammatory Factors and the Release of Calprotectin in Rats with Ulcerative Colitis
Wang Haiqiang1，Zheng Lihong2，Zhu Feng3，Liu Zhaoxia1，Wang Jingbin1，Zhang Yang1，Liang Guoying1，Liu Jindi3，Zhang Yuetao3
（1 The First Affiliated Hospital of Heilongjiang University of Traditional Chinese Medicine，Harbin 150040，China； 2 The Second Affiliated Hospital of Heilongjiang University of Traditional Chinese Medicine，Harbin 150001，China； 3 Heilongjiang University of Traditional Chinese Medicine，Harbin 150040，China）
AbstractObjective：To study the effects of Changyuning Granule （CYN） on ulcerative colitis induced by dinitrochlorobenzene/ethanoic acid in rats，and to explore its mechanism.Methods：Male SD rats were divided into 6 groups：the normal group，the model group，the low，medium and high dose group of CYN and the sulfonylamine group （SASP）.The ulcerative colitis model was induced by dinitrochlorobenzene/ethanoic acid.Disease activity index （DAI），colonic mucosa damage index （CMDI） and pathological histology were assessed.Serum ILβ，TNFα，and calcium protein （Calproteein，CP） were detected by ELISA.The expression of CP in colonic mucosa was detected by Western blot.Results：DAI results suggested that the model was successful.Compared with the normal group，ILβ，TNFα，and CP in the serum of the model group were significantly increased，and the index of CMDI，colonic mucosa CP were significantly increased.The DAI，CMDI，and mucosal CP in the colon tissue of each group of Changyuning Granules were decreased，and the levels of IL，TNF，and CP in serum were also significantly decreased.Conclusion：CYN Granule can effectively relieve the ulcerative colitis induced by dinitrochlorobenzene/ethanoic acid in rats.The mechanism may be related to downregulation of ILβ and TNFα expression and reduction of CP level.
Key WordsChangyuning； Ulcerative Colitis； ILβ； TNFα； CP
中图分类号：R2855文献标识码：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2018.10.045
溃疡性结肠炎（Ulcerative Colitis，UC）属于炎症性肠病之一，其发病机制尚不明確，临床症状表现为腹痛、腹泻、里急后重、黏液脓血便等[1]。目前，临床上治疗UC主要以糖皮质激素和水杨酸制剂为主，代表药有柳氮磺胺吡啶和美沙拉嗪，但是不良反应大，无法长期服用。现代医学研究表明，免疫失衡在UC发生过程中起关键作用，过度活化的效应细胞产生的抗体、炎性反应介质、细胞因子引起炎性病变导致组织破坏[2]。二硝基氯苯模型是一个典型的胃肠道迟发变态反应模型，其原理为长期存在的外源性抗原或机体自身抗原激活机体的免疫系统，产生细胞免疫反应，直接诱发或加重UC[3]。 本科室经历了近10多年的临床和实验课题研究，在方法中归纳出清热解毒，健脾燥湿法治疗本病，并经过反复摸索研制出经验方剂肠愈宁颗粒，在临床实践中肠愈宁颗粒治疗UC取得了良好的疗效，而且其安全性良好。本实验用DNBS诱导SD大鼠UC模型，研究UC大鼠在肠愈宁颗粒干预下CP在结肠黏膜、血清中的表达的变化和差异，同时结合相关炎性介质进一步阐明肠愈宁颗粒对UC进行有效的阻断和治疗，并提供科学的理论依据
1材料与方法
11材料
111动物清洁级SD大鼠60只，均为雄性，体重（250±15）g，由黑龙江中医药大学动物实验中心提供。实验动物许可证号：SCXK（黑）20140003。
112药物2、4二硝基氯苯（DNCB）：由上海安诺方胺化学品公司生产。肠愈宁颗粒（白头翁，黄连，黄零，赤石脂，焦白术等）组成。由江苏天阴药业生产。柳氮磺胺吡啶（SASP）（上海三维制药有限公司，生产批号：07051）。用前研碎，用生理盐水配置成混悬液。
113试剂与仪器VICTOR X3酶标仪，美国PerkinElmer公司；BI496 2000医学图像分析系统，成都泰盟科技有限公司；BT 25S型电子分析天平，德国Sartorius公司；HWS24恒温水浴锅，上海一恒科学仪器有限公司；电泳仪，上海精密仪器仪表有限公司，高速台式离心机，科大创新股份有限公司，凝胶成像分析系统。OMLQPA型生物组织切片机，湖北欧美莱医疗科技有限责任公司。
12方法
121分组与模型制备采用二硝基氯苯乙酸复合法制备大鼠UC模型。将60只SD大鼠随机分成实验组50只和正常组10只。实验组大鼠背部剃毛后，用2% 2，4二硝基氯苯丙酮溶液滴背部，1次/d，每只鼠5滴/次，连续14 d致敏。15 d向肛内约6 cm处的结肠腔内用1% 2，4二硝基氯苯乙醇液保留灌肠035 mL，于16 d在同部位注入01%乙酸溶液2 mL，准确计时15 s后，再用50 mL生理盐水冲洗。造模前后均给予大鼠高脂饮食。17 d随机抽取2只造模大鼠处死，取其结肠标本，病理检查确认有充血，水肿及典型溃疡形成即为造模成功。
122给药方法各观察组均于造模后1 d给予相应药物灌胃，连续两周。在建立UC病变动物模型的同时，肠愈宁高剂量组、中剂量组、低剂量组（CYNL，CYNM，CYNG）分别灌服相当于生药量为1 g/mL、2 g/mL、4 g/mL的肠愈宁顆粒溶液10 mL/（kg·d）。柳氮磺胺吡啶对照组（SASP）：灌服相当于生药量为02 g/（kg·d）柳氮磺胺吡啶悬浊液10 mL/（kg·d），药物均溶于质量分数为05% CMC溶液，超声溶解。而空白对照组、模型对照组给予等量生理盐水灌胃10 mL/（kg·d），在第31天处死大鼠并取材。
123检测指标与方法疾病活动指数（Disease Activity Index，DAI）参考文献[4]的方法，分别观察大鼠体重、大便性状及血便变化，具体计分标准见表1。
3讨论
目前，对于UC西药尚缺乏强有效的干预手段，UC的西药治疗如美沙拉嗪、4氨基水杨酸等虽对病情有所控制，不良反应较大。其次是皮质类固醇，是临床治疗急性暴发型和重度溃结患者的首选药物，长期应用易产生不良反应且不能防止复发。再次是免疫抑制剂，对常规药物治疗无效的UC有一定疗效，但对肝、肾及骨髓有毒性[6]。而中医药治疗溃结体现了较明显的优势，近些年中医药治疗溃结疗效显著，却无明显不良反应，体现出中药治疗溃结的优越性。我们经过近20余年的临床和实验研究总结出经验方肠愈宁颗粒。肠愈宁颗粒组方源自金元医家刘完素的名方白术黄芪汤（《素问病机气宜保命集·泻痢论》），结合我科名中医治疗UC的临床经验配药而成，在临床应用取得了良好的效果，有效率达90%以上，而且安全性良好[7]。本研究复制了的UC大鼠模型，并通过宏观和微观角度考察了UC大鼠肠道炎性反应，实验结果显示，肠愈宁颗粒调节了肠道异常免疫反应，使肠黏膜炎性反应和溃疡基本消除。佐证了肠愈宁颗粒的有效性。
UC病因和病机尚不明确，但免疫异常被公认为在炎症性肠病（Inflammatory Bowel Disease，IBD）中发挥着决定性的作用，包括细胞因子、炎性反应递质以及免疫调节等方面[8]。溃结与结肠癌的发生存在一定的因果关系，所以被WHO列为难治之病[9]。细胞因子可分为抗炎性细胞因子和促炎性细胞因子两类，正常人群中两类因子处于平衡状态，有研究表明，当抗炎性细胞因子异常减少或促炎性细胞因子异常增多可导致二者平衡被打破，进而促使肠道黏膜炎性反应的发生[10]
肿瘤坏死因子（Tumor Necrosis Factor，TNF）TNFα不仅具有抗肿瘤的活性，并且还能介导和调节机体的免疫反应、炎性反应、代谢等。TNFα通过促进内皮细胞粘附分子上调、趋化中性粒细胞发挥凝血酶原效应的作用，进而参与UC的发生，活动期UC，在血浆和粪便中均能检测到TNFα的表达，且水平升高[11]。IL1β属内分泌型细胞因子，可由多种细胞产生，如巨噬细胞、单核、内皮细胞和中性粒细胞等。在免疫炎性反应中有重要作用。IL1β具有较多的生物学活性，可以诱导淋巴因子的产生，活化T细胞、诱导急性期炎性反应免疫、蛋白质合成等。UC活动期IL1β的表达上调，间接提示它对UC的发病起重要作用。
钙卫蛋白（Calproteetin，CP）是一种杂合性的钙结合蛋白，来源于中性粒细胞和活化巨嗜細胞胞质，可作为一种炎性标志物。其具有抗蛋白酶活性和耐热性，在外界环境中和肠腔可长期保持稳定而不被细菌和酶破坏，其主要生物学功能包括抗微生物活性、调节免疫作用、参与细胞信号传递、抗增殖和诱导细胞凋亡、炎性反应中调节蛋白等[12]。国外研究表明钙卫蛋白的稳定性要好于以前的生物标记物，其浓度在UC活动期显著增加[13]。UC的研究，是目前免疫疾病防治研究的重点，依然存在着许多未解决的问题。钙卫蛋白作为调节蛋白在UC的防治中的相关研究极少。 本实验通过免疫印迹检测（Western blot）结肠组织CP，同时酶联免疫法（Euzy Melinked Immunosorbent Assay，ELISA）检查相关炎性介质TNFα、IL1β。结果表明模型组大鼠TNFα、IL1β的表达明显高于空白对照组，说明促炎细胞因子参与了UC的发病。经过肠愈宁颗粒治疗两周后，实验大鼠血清IL1β、TNFα的表达较模型组显著减少。表明肠愈宁颗粒治疗UC的机制可能是通过抑制促炎因子IL1β、TNFα的表达，进而调整了促炎因子与抗炎因子的平衡。此外，在血清和肠组织中，肠愈宁颗粒组的CP的含量比较模型组有显著的降低。本研究从细胞免疫和CP调节角度阐述肠愈宁颗粒影响UC的发病机制。本文可以为进一步研究肠愈宁颗粒治疗UC的机制以及UC药物的开发提供理论依据。
参考文献
[1]何小华，陈建勇.炎症性肠病发病的相关免疫机制[J].南昌大学学报：医学版，2011，51（10）：9395.
[2]路晓红，杨恩来，赵霞，等.溃疡性结肠炎免疫机制的研究进展[J].山西中医学院学报，2011，12（1）：6668.
[3]朱毅，趙锦，陈国彪，等.海南砂仁挥发油对2，4二硝基氯苯与乙酸诱发的大鼠溃疡性结肠炎的治疗作用[J].中国药理学与毒理学杂志，2009，23（5）：388394.
[4]王坤，宣秀敏，王莲，等.溃疡性结肠炎大鼠外周血CD4+CD25+Treg的变化及相关性研究[J].安徽医科大学学报，2012，47（3）：354356.
[5]Christine C，Michel C，Lecannu G.The prebiotic characteristics of fructooligo saccharides are necessary for reduction of TNBS induced colitis in rats [J].J Nutr，2003，133（1）：2127.
[6]郑家驹.炎症性肠病的维持缓解治疗[J].中华消化杂志，2007，27（12）：852854.
[7]谢晶日，林静.肠愈宁颗粒治疗溃疡性结肠炎临床疗效观察[J].中国中西医结合消化杂志，2010，18（3）：161.
[8]赵曼，高峰.溃疡性结肠炎发病机制研究进展[J].现代医学生物进展，2011，11（16）：170.
[9]Nguyen GC，TuskeyA，DassopoulosT，etal.Rising hospitalization rates for inflammatory bowel disease in the United States between 1998 and 2004[J].Inflammatory bowel diseases，2007，13：15291535.
[10]Brun JG，Haga HJ，Boe E，et al.Calprotectin in patient s with rheumat oid art hritis：relation toclinical and laboratory variables of disease activity[J].J Rheumatol，1992，19（6）：859862.
[11]王伟宁，张熙纯，刘丽.活动期溃疡性结肠炎发病机制的免疫学讨论[J].中国现代医学杂志，2003，13（16）：74.
[12]王少东，汪芳裕，万海军，等，钙卫蛋白监测在炎症性肠病患者中的意义[J].胃肠病学和肝病学杂志，2010，19（11）：10431044.
[13]Lv H，Hao SY，Yan NB.Faecal calprotectin meaning differential diagnosis among inflammatory bowel disease，irritable bowel syndrome colorectal cancer[J].Int J Lab Med，2012，33（21）：26512652.
（2018-08-14收稿责任编辑：徐颖）