建立胰腺癌MiaPaCa-2细胞与树突细胞(DC)融合的细胞，观察其体外诱导胰腺癌肿瘤抗原特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)的能力。
方法自胰腺癌患者外周血单核细胞中分离和培养DC，利用50% PEG-10% DMSO融合剂将MiaPaCa-2细胞融合到DC，以不加融合剂仅将DC与MiaPaCa-2共培养组及单纯DC组作为对照。采用FITC-CD86及PE-MUC1进行双标记，上流式细胞仪检测细胞融合率；MTT法检测各组DC存活率。按照DC与T淋巴细胞1∶10、1∶20、1∶40、1∶80的比例混合培养细胞，评价各组DC体外刺激自体T淋巴细胞的增殖能力；ELISA法检测各组DC体外激发的CTL的IL-2、IL-10、Granzyme B、IFN-γ分泌量。
结果DC与MiaPaCa-2融合细胞组的融合率为(42.30±7.30)%，明显高于共培养组的(7.21±1.06)%。DC组、共培养组、融合细胞组DC的存活率分别为95.0%以上、85.0%、62.8%，融合细胞组DC存活率显著低于DC组及共培养组，差异有统计学意义(P值均<0.05)。DC∶T淋巴细胞为1∶10时，DC组、共培养组、融合细胞组DC刺激自体T细胞增殖指数分别为219±42、3 584±317、8 201±424，1∶20时分别为110±14、2 179±104、6 152±104，融合细胞组显著高于DC组及共培养组，差异均有统计学意义(P值均<0.05)；为1∶40、1∶80时3组细胞的T细胞增殖指数差异无统计学意义(P值均>0.05)。DC∶T淋巴细胞为1∶10时，DC组、共培养组、融合细胞组DC激发的CTL的IL-2分泌量分别为(27.30±5.21)、(897.44±93.05)、(2243.80±381.46)ng/L；IL-10分泌量分别为(19.55±2.05)、(424.60±108.25)、(706.53±161.29)ng/L；Granzyme B分泌量为(16.23±1.23)、(451.07±120.50)、(1327.77±205.15)ng/L；IFN-γ分泌量为(30.11±4.32)、(982.00±124.68)、(2421.04±488.50)ng/L。融合细胞组激发的CTL的细胞因子分泌量显著高于DC组及共培养组，差异均有统计学意义(P值均<0.05)。
结论DC与MiaPaCa-2融合的细胞具备体外诱导胰腺癌肿瘤抗原特异性CTL的能力。