谷氨酰胺合成酶腺苷酰化位点的定点突变和产胺的初步研究

来源 :过程工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：chunxi1208

【摘要】

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为解决谷氨酰胺合成酶腺苷酰化修饰失活的问题，利用基因定点突变的方法将谷氨酸棒杆菌的谷氨酰胺合成酶（Glutamine Synthetase，GS）腺苷酰化位点由Tyr405突变为Phe405，并在大肠杆菌

【作者】

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黄星曾行刘铭龚博胡淼曹竹安

【机构】

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清华大学化学工程系

【出处】

：

过程工程学报

【发表日期】

：

2008年1期

【关键词】

：

谷氨酰胺大肠杆菌谷氨酰胺合成酶腺苷化位点 glutamine E. coli glutamine synthetase putative adeny

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目（编号：20506012）,国家重点基础研究发展规划（973）基金资助项目（编号：2003CB716007）

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为解决谷氨酰胺合成酶腺苷酰化修饰失活的问题，利用基因定点突变的方法将谷氨酸棒杆菌的谷氨酰胺合成酶（Glutamine Synthetase，GS）腺苷酰化位点由Tyr405突变为Phe405，并在大肠杆菌中获得突变后GS的表达．对比腺苷酰化位点突变前后的重组大肠杆菌pET-3a／GSI和pET-3a／GSIM在高氨环境下的GS活性和谷氨酰胺产量，发现重组菌pET-3a／GSIM在高氨环境下的最大酶活是150U／L，产谷氨酰胺浓度为17．5gm，分别是pET-3a／GSI酶活（30U／L）的5．0倍和产谷氨

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