【摘 要】
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目的 死亡时间推断是法医病理学实践的重点.运用mRNA定量技术进行死亡时间推断已成为目前研究的热点.在进行mRNA指标挑选时,为了排除其他干扰因素的影响,实验数据必须要经过
【机 构】
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复旦大学基础医学院法医学系,上海,200032深圳市公安局刑事科学技术研究所,法医病理学公安部重点实验室,广东深圳 518040;上海市公安局浦东分局刑事科学技术研究所,上海,200125;上海市公安
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目的 死亡时间推断是法医病理学实践的重点.运用mRNA定量技术进行死亡时间推断已成为目前研究的热点.在进行mRNA指标挑选时,为了排除其他干扰因素的影响,实验数据必须要经过内参指标的标准化.因此,内参基因的选择对实验结果具有重要影响.方法 SD大鼠颈椎脱臼处死后置于4℃、15℃、25℃、35℃环境温度下,在死后0h、6h、12h、18h、24h五个时间点取骨骼肌组织.利用实时荧光定量PCR技术测定常用内参基因Ct值,并使用三种内参评估软件(geNorm、NormFinder、BestKeeper)综合分析内参稳定性.结论 综合三种内参评估软件结果,在低温条件下,RPS29、RPL13是较合适的内参,而在高温条件下,5SrRNA、18SrRNA是较合适的内参.在35℃时,GAPDH、HPRT、PGK1、UBC、B2M与死亡时间有明显相关性.
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