【摘 要】
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为了构建幽门螺杆菌(H. pylo ri)全长hpaA基因表达质粒,在大肠杆菌中表达重组HpaA(reHpaA)蛋白, 我们用PCR扩增全长hpaA基因,经适当的酶切-连接反应将其连入原核表达质粒pTrc
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为了构建幽门螺杆菌(H. pylo ri)全长hpaA基因表达质粒,在大肠杆菌中表达重组HpaA(reHpaA)蛋白, 我们用PCR扩增全长hpaA基因,经适当的酶切-连接反应将其连入原核表达质粒pTrc99A, 反应产物转化大肠杆菌JM105, 用Amp(+)培养基筛选, 提取重组菌质粒,PCR和酶切鉴定, 筛选阳性克隆, 并用重组菌质粒进行hpaA基因测序.阳性克隆经IPTG诱导培养, 用SDS-PAGE电泳和Western blo t进行reHpaA表达分析和鉴定, 用薄层扫描分析reHpaA含量.
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