【摘 要】
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目的 探究人巨细胞病毒活动性感染对早孕绒毛细胞基质金属蛋白酶9(MMP9)和组织型基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP1)活性的影响.方法 收集2016年10月-2018年10月在湘潭市妇幼保健院
【机 构】
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湖南环境生物职业技术学院医学院,湖南衡阳,421005;湘潭市妇幼保健院产科,湖南湘潭,411104;衡阳市第一人民医院产科,湖南衡阳,421002
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目的 探究人巨细胞病毒活动性感染对早孕绒毛细胞基质金属蛋白酶9(MMP9)和组织型基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP1)活性的影响.方法 收集2016年10月-2018年10月在湘潭市妇幼保健院和衡阳市第一人民医院自愿接受流产的健康孕妇的绒毛,人巨细胞病毒感染后,免疫组化检测细胞角蛋白7(CK7)、人波形蛋白(Vim)、HER-2基因(c-erbB-2)的表达以观察绒毛细胞纯度.免疫组化检测pp65抗原用于观察人巨细胞病毒(HCMV)的感染情况.Western Blot、荧光定量PCR(RT PCR)和酶联免疫吸附测定(ELISA)用于检测HCMV感染后早孕绒毛细胞中MMP9和TIMP1的表达水平.结果 免疫组化染色显示,分离的原代细胞为高纯度绒毛细胞且HCMV可感染原代早孕绒毛细胞.PCR结果显示,HCMV组MMP9基因表达水平为0.23±0.08,低于对照组(P<0.05),TIMP1基因表达水平为5.49±1.76,高于对照组(P<0.05).HCMV感染后第4天,HC-MV组早孕绒毛细胞胞质中MMP9蛋白表达水平为0.18±0.08,低于对照组(P<0.05),TIMP1蛋白表达水平为0.97±0.16,高于对照组(P<0.05).此外,与模拟感染细胞相比,感染HCMV的巨噬细胞中MMP-9活性持续降低.感染后第7天HCMV组上清液中MMP9蛋白水平低于对照组(P<0.05);感染后第4天和第7天HCMV组上清液中TIMP1蛋白水平高于对照组(P<0.05).结论 HCMV感染可显著下调原代早孕绒毛细胞MMP9的基因和蛋白表达,上调T IM P1的基因和蛋白表达.
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