超声靶向破坏微泡联合核定位信号肽增强基因转染治疗犬心肌梗死的实验研究

来源 :中华超声影像学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhuguangxinli
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目的

利用超声靶向破坏微泡(UTMD)技术联合核定位信号(NLS)肽提高人血管生成素-1(hAng-1)基因体内转染效率,治疗犬心肌梗死。

方法

46只犬经股动脉明胶海绵栓塞法成功建立急性心肌梗死模型后随机分为4组,每组10只:①空白对照(A)组;②hAng-1(B)组;③UTMD+hAng-1(C)组;④UTMD+NLS + hAng-1(D)组。模型建成后1周,经静脉注入各组治疗试剂,同时C、D组超声辐照心前区。建模前、建模后1周基因转染前及转染后28 d分别行超声检查,二维超声心动图检测各组犬射血分数及室壁运动情况,心肌声学造影检测各组犬梗死及周围区心肌血流灌注情况。转染后28 d,RT-PCR和Western Blot检测hAng-1基因相对表达量;免疫荧光SP法定位新生毛细血管,显微镜下计数新生毛细血管密度(MVD);Masson染色及心脏大体标本评价梗死区纤维化程度及面积;比较4组基因治疗效果。

结果

①建模前,4组犬室壁运动、心功能正常,心肌造影各室壁未见充盈缺损。心肌梗死建模后1周基因转染前,4组犬室壁运动幅度及射血分数均明显减低,心肌造影均显示充盈缺损,组间差异无统计学意义(P>0.05)。基因转染后28 d,A、B、C、D组心功能依次增高,C、D组与其他各组比较差异有统计学意义(P<0.05)。心肌造影D组可见较多造影剂充填,C组少许造影剂充填,A、B组造影剂充盈缺损。②RT-PCR和Western Blot显示D组hAng-1基因表达量明显高于其他组,C、D组与其他各组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。③免疫荧光SP法结果显示A、B、C、D组MVD依次增大,C、D组与其他各组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。④Masson染色及心脏大体标本显示心肌纤维化程度及面积A~D组依次减低。

结论

NLS肽能促进UTMD介导hAng-1基因在缺血心肌内的高效表达,为缺血性心脏病的基因治疗提供新方法。

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