靶向肝细胞重组逆转录病毒载体的构建

来源 :山东大学学报:医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:haokanhaowan123
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目的:包装5种携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的重组逆转录病毒,筛选肝细胞靶向性好的病毒载体。方法:在前期构建的融合表达质粒基础上,构建4种新的表达质粒,采用脂质体法将这5种质粒分别与质粒pL-EGFP共转染已稳定表达Gag-Pol蛋白的NIH3T3包装细胞系中,48h后收获病毒上清,分别感染肝源性HepG2215细胞及非肝源性293T细胞,48h后提取细胞总RNA,荧光定量PCR比较重组病毒的靶向性。结果:酶切鉴定结果表明4种新的表达质粒构建成功,包装的病毒滴度约为105cfu/ml,以pcDNA
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