【摘 要】
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目的：制备人Argonaute2（Ago2）的多克隆抗体,鉴定其特异性,并应用该抗体检测Ago2在人各细胞系中的表达差异及细胞定位。方法：用DNAstar软件寻找抗原性高的Ago2序列区域（命名为k-Ago
【机 构】
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天津医科大学基础医学院天津市生命科学中心实验室
【基金项目】
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本文为国家自然科学基金项目（No.30873017）、天津市自然科学基金重点项目（No.08JCZDJC23300,No.09JCZDJC17500）
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目的：制备人Argonaute2（Ago2）的多克隆抗体,鉴定其特异性,并应用该抗体检测Ago2在人各细胞系中的表达差异及细胞定位。方法：用DNAstar软件寻找抗原性高的Ago2序列区域（命名为k-Ago2）,构建k-Ago2的表达质粒,转化大肠杆菌并诱导表达。融合蛋白经切胶回收纯化后免疫大白兔制备抗体。以ELISA检测抗体效价,Western blot鉴定抗体特异性及检测Ago2在细胞系中的表达差异,免疫荧光染色观察Ago2的细胞定位。结果：成功构建表达质粒,继而k-Ago2得以表达与纯化,免疫大白兔
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