论文部分内容阅读
摘要[目的]研究霍山石斛提取物对大鼠血脂的影响。[方法]采用混合型高脂血症动物模型试验，通过测定3个不同剂量组受试样品喂养的大鼠与高脂对照组大鼠的血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDLC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDLC），并经过统计学分析判断不同组别之间是否存在显著性差异。[结果]与高脂对照组值相比，大鼠接受受试样品灌胃45d后，各剂量组TC和LDLC值均降低，且存在显著差异；3个剂量组TG值下降也均具有显著差异，3个剂量组HDLC值与高脂对照组无显著差异。[结论]霍山石斛提取物有降血脂功能。
关键词霍山石斛；大鼠；提取物；降血脂
中图分类号S567.23 +9文献标识码
A文章编号0517-6611（2015）28-073-02
HypolipidemicActivityoftheExtractsofDendrobiumhuoshanense
DAIYafeng 1，ZHENGTing 2，WANGShiwen 1etal（1.JiuxianzunDendrobiumHuoshanCo.，Ltd，Lu’an，Anhui237005；2.DepartmentofChemicalandChemicalEngineering，HefeiNormalUniversity，Hefei，Anhui230000）
Abstract[Objective]TostudyhypolipidemicactivityoftheextractsofDendrobiumhuoshanense.[Method]Basedonmodelexperimentsofanimalswithcombinedhyperlipidemia，ratsweretreatedwiththreedifferentdosesofthewaterextractofDendrobiumhuoshanense，withhighfatgroupascontroltrial.ThevaluesofTC，TG，LDLCandHDLCinserumweredeterminedandanalyzedstatisticallybySPSS.[Result]Comparedwithhighfatcontroltrial，theTC，TGandLDLCinserumwerebroughtdown，afterthetreatmentbythewaterextractofDendrobiumhuoshanensefor45days，significantdifferencewithdoseweredetectedbySPSSanalysis.AllthetreatmentsshowednegligibleeffectsontheHDLCvalue.[Conclusion]TheextractsofDendrobiumhuoshanensedemonstratedobvioushypolipidemicactivity.
KeywordsDendrobiumhuoshanense；Rat；Extracts；Hypolipidemic
霍山石斛是兰科多年生草本植物，主产于大别山区的安徽省霍山县，是我国传统的名贵中药材，具有益胃生津、滋阴清热、清心明目、润肺止渴等功效 [1-2]。多糖是霍山石斛最主要的活性成分之一，近年来研究表明，霍山石斛多糖具有抗氧化 [3]、抗肿瘤 [4]和增强机体免疫力 [5]等作用。关于霍山石斛的降血脂作用，张静等 [6]研究了霍山石斛复方胶囊的降血脂功效，而霍山石斛单一提取物降血脂功效的研究却鲜有报道，笔者在此按照国家食品药品监督局发布的《辅助降血脂功能评价方法》相关要求 [7]，通过监测不同组别受试动物的体重、血清总胆固醇（TC）、血清甘油三酯（TG）、血清高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）、血清低密度脂蛋白胆固醇（LDLC）等方面，评价霍山石斛提取物对小鼠血脂水平的影响，为其产品的开发利用和市场价值挖掘提供科学依据。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1样品。霍山石斛DendrobiumhuoshanenseC.Z.Tang&S.J.Cheng，采自九仙尊霍山石斛股份有限公司太平畈霍山石斛种质资源基地，原料经干燥、粉碎处理后采用水提取工艺制备霍山石斛提取物。依据《中国药典》2010版第一部，石斛药材的最高用量为12g，按20%的提取率，样品推荐剂量为2400mg/（人·d），该试验按40mg/（kg·d）。
1.1.2试验动物。健康雄性SD大鼠48只，体重135～180g，清洁级，由南京医科大学实验动物中心提供，合格证号SCXK（苏）2008-0004号。SPF级实验动物环境设施合格证号SYXK（苏）2007-0020号。给予灭菌水自由引用。
1.1.3仪器和试剂。解剖器械、OLYMPUSAU型自动生化分析仪，胆固醇（AR）、胆酸钠（AR）、血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDLC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）测定试剂盒。
1.1.4饲料。
1.1.4.1维持饲料。全价粉状灭菌鼠饲料。
1.1.4.2高脂饲料。在维持饲料中添加20.0%蔗糖、15%猪油、1.2%胆固醇、0.2%胆酸钠，适量的酪蛋白、磷酸氢钙、石粉等。
1.2方法
1.2.1剂量设计及分组。样品推荐摄入量40mg/（kg·d），试验设40、200和1000mg/（kg·d）3个剂量组（相当于人体推荐量的1、5和25倍），同时设置一个高脂饲料对照组，每组12只。称取样品400、2000和10000mg加纯净水至100ml配制成所需浓度经口灌胃，灌胃容积为10ml/（kg·d），高脂对照组每日灌胃等量纯净水。连续给药45d测定各项血脂值。 1.2.2试验方法。采用混合型高脂血症动物模型试验，在试验环境条件下大鼠喂基础饲料7d，然后不禁食在大鼠眼内眦静脉采血，采血后尽快分离血清，测定血清TC、TG、LDLC、HDLC水平，根据血清TC值水平随机分组，高脂对照组继续给予高脂饲料，其余剂量组给予高脂饲料的同时给予不同剂量的受试样品，连续灌胃45d。每周称量体重，于试验结束时不禁食采血，采血后尽快分离血清，测定血清TC、TG、LDLC、HDLC水平。
1.2.3数据处理。采用SPSS统计软件，先做方差齐性检验，再进行多个试验组和对照组均数的单因素方法分析及两两比较统计。
1.2.4结果判定。各剂量组与高脂对照组比较，任一剂量组TC或LDLC降低，差异有显著性，且各剂量组HDLC不显著低于高脂对照组，TG不显著高于高脂对照组，可判定该受试样品辅助降低血脂功能动物试验结果阳性。
2结果与分析
2.1霍山石斛提取物对大鼠体重的影响
由表1可知，各处理组的大鼠随着试验时间延长，体重均有不同程度的增加，各组大鼠生长正常。但不同霍山石斛提取物剂量组在试验前、中、后其所受试大鼠的体重与高脂对照组比较，差异不显著性（P>0.05），试验前后体重增长也无显著性变化，说明霍山石斛提取物对大鼠体重的影响不明显，无相关性。
2.2样品对大鼠血脂水平的影响
从试验前大鼠血脂情况（表2）可以看出，试验前各剂量组TC、TG、HDLC和LDLC值无组间差异（P>0.05）。大鼠接受不同剂量受试样品45d后血脂情况（表3）显示，
与高脂对照组值相比，大鼠接受受试样品灌胃45d后，各剂量组TC和LDLC值均降低，且存在显著差异（P<0.05）；3个剂量组TG值下降也均具有显著差异（P<0.05），3个剂量组HDLC值与高脂对照组无显著差异。由此可见，该受试样品辅助降低血脂功能动物试验结果阳性。
3讨论
高脂血症被认为是导致动脉粥样硬化的重要危险因素，也是促进高血压、糖尿病引发因素之一 [8]。因此目前高脂血症的发病机理、治疗方案仍是研究的热点方向。由于目前广泛使用的降脂药不良反应比较多、不适合长期服用，因此从传统中药材资源中开发有效地预防及治疗高脂血症的降脂药已成为研发的热点之一。该试验结果表明，霍山石斛提取物3个剂量组均可以有效地降低大鼠高血脂模型的TG、TC、LDLC含量，说明霍山石斛提取物有一定的降脂作用，有望开发成为安全有效的降脂药用于防治心血管疾病。
参考文献
[1]崔田，马洪怡.霍山石斛的研究概况[J].吉林中医药，2007，27（10）：66-68.
[2]林萍，毕志明，徐红，等.石斛属植物药理活性研究进展[J].中草药，2003，34（11）：19-22.
[3]郝杰，查学强，鲍素华，等.霍山石斛不同分子量多糖体外抗氧化研究[J].食品科学，2009，34（15）：94-98.
[4]黄森.霍山石斛多糖提取分离以及抗肿瘤活性的研究[D].合肥：合肥工业大学，2007.
[5]张炜玲，李滨，王新生，等.复方霍山石斛浸膏增强免疫力作用的研究[J].安徽农业科学，2012，40（30）：14792-14794.
[6]张静，连超群，吴守伟，等.霍山石斛胶囊降血脂疗效的实验研究[J].中国老年学杂志，2010（30）：3134-3136.
[7]卫生部.保健食品检验与评价技术规范[M].北京：清华同方电子出版社，2003.
[8]孙冬梅，汪洁怡，董玉娟，等.布渣叶不同提取物降血脂活性[J].辽宁中医药大学学报，2014，16（11）：22-25.
关键词霍山石斛；大鼠；提取物；降血脂
中图分类号S567.23 +9文献标识码
A文章编号0517-6611（2015）28-073-02
HypolipidemicActivityoftheExtractsofDendrobiumhuoshanense
DAIYafeng 1，ZHENGTing 2，WANGShiwen 1etal（1.JiuxianzunDendrobiumHuoshanCo.，Ltd，Lu’an，Anhui237005；2.DepartmentofChemicalandChemicalEngineering，HefeiNormalUniversity，Hefei，Anhui230000）
Abstract[Objective]TostudyhypolipidemicactivityoftheextractsofDendrobiumhuoshanense.[Method]Basedonmodelexperimentsofanimalswithcombinedhyperlipidemia，ratsweretreatedwiththreedifferentdosesofthewaterextractofDendrobiumhuoshanense，withhighfatgroupascontroltrial.ThevaluesofTC，TG，LDLCandHDLCinserumweredeterminedandanalyzedstatisticallybySPSS.[Result]Comparedwithhighfatcontroltrial，theTC，TGandLDLCinserumwerebroughtdown，afterthetreatmentbythewaterextractofDendrobiumhuoshanensefor45days，significantdifferencewithdoseweredetectedbySPSSanalysis.AllthetreatmentsshowednegligibleeffectsontheHDLCvalue.[Conclusion]TheextractsofDendrobiumhuoshanensedemonstratedobvioushypolipidemicactivity.
KeywordsDendrobiumhuoshanense；Rat；Extracts；Hypolipidemic
霍山石斛是兰科多年生草本植物，主产于大别山区的安徽省霍山县，是我国传统的名贵中药材，具有益胃生津、滋阴清热、清心明目、润肺止渴等功效 [1-2]。多糖是霍山石斛最主要的活性成分之一，近年来研究表明，霍山石斛多糖具有抗氧化 [3]、抗肿瘤 [4]和增强机体免疫力 [5]等作用。关于霍山石斛的降血脂作用，张静等 [6]研究了霍山石斛复方胶囊的降血脂功效，而霍山石斛单一提取物降血脂功效的研究却鲜有报道，笔者在此按照国家食品药品监督局发布的《辅助降血脂功能评价方法》相关要求 [7]，通过监测不同组别受试动物的体重、血清总胆固醇（TC）、血清甘油三酯（TG）、血清高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）、血清低密度脂蛋白胆固醇（LDLC）等方面，评价霍山石斛提取物对小鼠血脂水平的影响，为其产品的开发利用和市场价值挖掘提供科学依据。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1样品。霍山石斛DendrobiumhuoshanenseC.Z.Tang&S.J.Cheng，采自九仙尊霍山石斛股份有限公司太平畈霍山石斛种质资源基地，原料经干燥、粉碎处理后采用水提取工艺制备霍山石斛提取物。依据《中国药典》2010版第一部，石斛药材的最高用量为12g，按20%的提取率，样品推荐剂量为2400mg/（人·d），该试验按40mg/（kg·d）。
1.1.2试验动物。健康雄性SD大鼠48只，体重135～180g，清洁级，由南京医科大学实验动物中心提供，合格证号SCXK（苏）2008-0004号。SPF级实验动物环境设施合格证号SYXK（苏）2007-0020号。给予灭菌水自由引用。
1.1.3仪器和试剂。解剖器械、OLYMPUSAU型自动生化分析仪，胆固醇（AR）、胆酸钠（AR）、血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDLC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）测定试剂盒。
1.1.4饲料。
1.1.4.1维持饲料。全价粉状灭菌鼠饲料。
1.1.4.2高脂饲料。在维持饲料中添加20.0%蔗糖、15%猪油、1.2%胆固醇、0.2%胆酸钠，适量的酪蛋白、磷酸氢钙、石粉等。
1.2方法
1.2.1剂量设计及分组。样品推荐摄入量40mg/（kg·d），试验设40、200和1000mg/（kg·d）3个剂量组（相当于人体推荐量的1、5和25倍），同时设置一个高脂饲料对照组，每组12只。称取样品400、2000和10000mg加纯净水至100ml配制成所需浓度经口灌胃，灌胃容积为10ml/（kg·d），高脂对照组每日灌胃等量纯净水。连续给药45d测定各项血脂值。 1.2.2试验方法。采用混合型高脂血症动物模型试验，在试验环境条件下大鼠喂基础饲料7d，然后不禁食在大鼠眼内眦静脉采血，采血后尽快分离血清，测定血清TC、TG、LDLC、HDLC水平，根据血清TC值水平随机分组，高脂对照组继续给予高脂饲料，其余剂量组给予高脂饲料的同时给予不同剂量的受试样品，连续灌胃45d。每周称量体重，于试验结束时不禁食采血，采血后尽快分离血清，测定血清TC、TG、LDLC、HDLC水平。
1.2.3数据处理。采用SPSS统计软件，先做方差齐性检验，再进行多个试验组和对照组均数的单因素方法分析及两两比较统计。
1.2.4结果判定。各剂量组与高脂对照组比较，任一剂量组TC或LDLC降低，差异有显著性，且各剂量组HDLC不显著低于高脂对照组，TG不显著高于高脂对照组，可判定该受试样品辅助降低血脂功能动物试验结果阳性。
2结果与分析
2.1霍山石斛提取物对大鼠体重的影响
由表1可知，各处理组的大鼠随着试验时间延长，体重均有不同程度的增加，各组大鼠生长正常。但不同霍山石斛提取物剂量组在试验前、中、后其所受试大鼠的体重与高脂对照组比较，差异不显著性（P>0.05），试验前后体重增长也无显著性变化，说明霍山石斛提取物对大鼠体重的影响不明显，无相关性。
2.2样品对大鼠血脂水平的影响
从试验前大鼠血脂情况（表2）可以看出，试验前各剂量组TC、TG、HDLC和LDLC值无组间差异（P>0.05）。大鼠接受不同剂量受试样品45d后血脂情况（表3）显示，
与高脂对照组值相比，大鼠接受受试样品灌胃45d后，各剂量组TC和LDLC值均降低，且存在显著差异（P<0.05）；3个剂量组TG值下降也均具有显著差异（P<0.05），3个剂量组HDLC值与高脂对照组无显著差异。由此可见，该受试样品辅助降低血脂功能动物试验结果阳性。
3讨论
高脂血症被认为是导致动脉粥样硬化的重要危险因素，也是促进高血压、糖尿病引发因素之一 [8]。因此目前高脂血症的发病机理、治疗方案仍是研究的热点方向。由于目前广泛使用的降脂药不良反应比较多、不适合长期服用，因此从传统中药材资源中开发有效地预防及治疗高脂血症的降脂药已成为研发的热点之一。该试验结果表明，霍山石斛提取物3个剂量组均可以有效地降低大鼠高血脂模型的TG、TC、LDLC含量，说明霍山石斛提取物有一定的降脂作用，有望开发成为安全有效的降脂药用于防治心血管疾病。
参考文献
[1]崔田，马洪怡.霍山石斛的研究概况[J].吉林中医药，2007，27（10）：66-68.
[2]林萍，毕志明，徐红，等.石斛属植物药理活性研究进展[J].中草药，2003，34（11）：19-22.
[3]郝杰，查学强，鲍素华，等.霍山石斛不同分子量多糖体外抗氧化研究[J].食品科学，2009，34（15）：94-98.
[4]黄森.霍山石斛多糖提取分离以及抗肿瘤活性的研究[D].合肥：合肥工业大学，2007.
[5]张炜玲，李滨，王新生，等.复方霍山石斛浸膏增强免疫力作用的研究[J].安徽农业科学，2012，40（30）：14792-14794.
[6]张静，连超群，吴守伟，等.霍山石斛胶囊降血脂疗效的实验研究[J].中国老年学杂志，2010（30）：3134-3136.
[7]卫生部.保健食品检验与评价技术规范[M].北京：清华同方电子出版社，2003.
[8]孙冬梅，汪洁怡，董玉娟，等.布渣叶不同提取物降血脂活性[J].辽宁中医药大学学报，2014，16（11）：22-25.