大鼠心肌H^+—ATP酶抑制蛋白基因克隆及初步鉴定

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目的和方法;根据大鼠线粒体H^+-ATP酶抑制蛋白基因(IF1)cDNA序列,设计并人工合成一对特异性扩增IF1cDNA的引物,以提取的大鼠心肌mRNA为模板反转录-聚合酶链式反应扩增出约400bp条带,以Klenow酶处理、纯化PCR产物,与经Smal酶切线性化的pUC19质粒DNA连接,经转化、筛选初步获得两个重组质粒。对重组质粒进行酶切图谱分析并以重组质粒为模板做PCR检测。结果:该质粒为IF1cDNA基因重组pUC19,并且该基因以正向插入,命名为pIF1。
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