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在一小试管中，IgG包被的聚苯乙烯球（直径3.2mm）先与已知或待测抗原保温，再与Fab′—辣根过氧化物酶（HRP）交联物保温。Fab′—HRP交联物是使用N—（ε—马来酰亚胺已酰）琥珀酰亚胺酯（EMCS）作为双功能交联剂，通过Fab′铰链部的巯基和HRP上的氨基进行交联。HRP的活力用50μ10.5mM的3，3′，5，5′—四甲基联苯胺为底物进行测定，然后加200μl4N H2SO4中止酶反应，最后置于—微量比色池中用分光光度计检测。上述方法对HRP的最小测定值小至3.0 attomol（0.12pg）／管，胰岛素的最小测定值为0.03μU（1.3pg）／管。本方法适用于检测血清胰岛素。对其具有进一步大幅度提高测定灵敏度的潜力作了讨论。