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目的
探讨微RNA(miR)-9a-5p在H2O2致神经细胞损伤中的作用及其可能机制。
方法以PC12细胞为研究对象,CCK-8法和流式细胞仪检测H2O2处理对细胞增殖、凋亡的影响,同时检测H2O2处理对细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放的影响,分析miR-9a-5p过表达和叉头框蛋白O1(FOXO1)抑制表达对H2O2致PC12细胞损伤的作用,双荧光素酶报告基因实验验证miR-9a-5p是否靶向作用于FOXO1,分析共表达miR-9a-5p和FOXO1对H2O2致PC12细胞损伤的影响。
结果H2O2处理PC12细胞,明显降低细胞存活率和细胞中miR-9a-5p的表达,诱导细胞凋亡率和LDH释放量增加,并促进细胞中FOXO1 mRNA和蛋白表达;miR-9a-5p过表达和FOXO1抑制表达均可逆转H2O2对PC12细胞的损伤;miR-9a-5p过表达抑制PC12细胞中FOXO1的表达,而miR-9a-5p抑制后促进细胞中FOXO1的表达,双荧光素酶报告基因实验证实FOXO1是miR-9a-5p的负调控靶基因;过表达FOXO1可逆转miR-9a-5p过表达对H2O2致PC12细胞损伤的保护作用。
结论miR-9a-5p可能通过靶向抑制FOXO1的表达,对H2O2致神经细胞损伤发挥保护作用。