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目的 观察碱性成纤维生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)和血小板衍生因子(PDGF-BB)对小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外增殖和成骨分化的影响.方法 采用贴壁培养纯化小鼠BMSCs,培养液(DMEM/F12,10%胎牛血清,青、链霉素)中添加(实验组)或者不添加(对照组)细胞因子bFGF、EGF和PDGF-BB(浓度均为10μg/L)进行培养,取传至第3代的细胞进行成骨分化,成骨诱导液:1×10-8 mol/L地塞米松、50 μmol/L抗坏血酸、10 mmol/L β-甘油磷酸钠.流式细胞仪检测细胞表面标记抗原CD45和CD90的表达;SYBgreen荧光定量聚合酶链反应(PCR)扩增检测成骨细胞特异性基因骨钙素和Ⅰ型胶原的表达;碱性磷酸酶染色和茜素红染色检测成骨细胞的分化.结果 初始接种后,对照组的小鼠BMSCs贴壁较快,而传代后实验组的小鼠BMSCs增殖较快.对照组和实验组的小鼠BMSCs经传代纯化后CD45、CD90的阳性表达率分别为(27.34±0.69)%、(41.93 ±0.34)%和(0.48±0.12)%、(82.78 ±0.25)%,实验组的小鼠BMSCs在传代过程中较少观察到细胞的老化现象,细胞的纯化程度较高,而且其向成骨分化的效率明显高于对照组细胞.结论 联合使用细胞因子bFGF、EGF和PDGF-BB可促进小鼠间BMSCs的体外增殖和干性的维持,并且有利于其向成骨细胞的分化。