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目的:构建带线粒体锚定信号肽的凋亡诱导因子(AIF)融合表达载体,研究在A549细胞中AIF线粒体锚定与其抗氧化应激功能的关系。方法:利用PCR将AIF原有线粒体定位信号(1—120aa)替换成具有锚定功能的细胞色素c氧化酶Ⅳ亚型(COXIV)线粒体定位信号,并将COX—A1F克隆至pEGFP—N1和pDsRedl—N1载体,构建COX—AIF—GFP和COX—AIF—RFP融合表达载体;利用免疫印迹和激光共聚焦技术检测COX—AIF—GFP和COX—AIF—RFP的表达及其与线粒体的共定位;利用DCF染