【摘 要】
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目的 探讨miRNA-21在人黑素瘤细胞系A375、M14中的表达及对其细胞活性的影响.方法 采用荧光定量PCR法,以U6基因为内参,分别检测A375、M14细胞中miRNA-21的相对含量.利用LipofectamineTM2000脂质体将三种浓度的miRNA-21抑制剂分别转染这两种细胞系,用CCK-8检测转染前后实验组、对照组的细胞活性.用SPSS13.0统计软件分析细胞活性的变化情况.结果
【机 构】
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210042,南京,中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所,210042,南京,中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所,210042,南京,中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所,国家人类基因组
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目的 探讨miRNA-21在人黑素瘤细胞系A375、M14中的表达及对其细胞活性的影响.方法 采用荧光定量PCR法,以U6基因为内参,分别检测A375、M14细胞中miRNA-21的相对含量.利用LipofectamineTM2000脂质体将三种浓度的miRNA-21抑制剂分别转染这两种细胞系,用CCK-8检测转染前后实验组、对照组的细胞活性.用SPSS13.0统计软件分析细胞活性的变化情况.结果 荧光定量PCR法检测提示,miRNA-21在A375细胞系中的表达(2-△CT值为1.2928±0.1509)明显高于M14细胞系(2-△CT值为0.1894±0.1803).miRNA-21抑制剂浓度为90 nmol/L时,A375、M14细胞活性受到极显著抑制,细胞活性(R值)分别为0.7362±0.1662、0.7295±0.1478;当浓度为180 nmol/L、270 nmol/L时,A375细胞活性显著下降,R值分别为0.7248±0.3204、0.6767±0.2998,而M14细胞活性无显著变化.结论 miRNA-21在A375、M14两种人黑素瘤细胞系中均有不同程度的表达.miRNA-21在A375、M14细胞系中可以促进细胞增殖,可能下调了某些肿瘤抑制因子而起到癌基因样作用。
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