【摘 要】
：
目的 建立一种金黄色葡萄球菌快速分子检测技术. 方法 根据金黄色葡萄球菌耐热核酸酶基因(nuc)保守区序列设计合成特异性引物,通过对反应条件进行优化,建立金黄色葡萄球菌重
【机 构】
：
南开大学药学院,天津,300000;国家卫生健康委员会肠道病原微生物重点实验室,江苏省疾病预防控制中心;中国科学院生物物理研究所;天津国际生物医药联合研究院
论文部分内容阅读
目的 建立一种金黄色葡萄球菌快速分子检测技术. 方法 根据金黄色葡萄球菌耐热核酸酶基因(nuc)保守区序列设计合成特异性引物,通过对反应条件进行优化,建立金黄色葡萄球菌重组酶介导的等温扩增技术(Recombinase aided amplification,RAA);表达纯化CRISPR-Cas13a蛋白,设计特异的crRNA (CRISPR RNA),以crRNA引导CRISPR-Cas13a蛋白对RAA产物进行检测;对优化的方法进行灵敏性和特异性评价,同时采用该方法与real-time PCR法对食品标本中的金黄色葡萄球菌进行检测,评价方法的一致性. 结果 CRISPR-Cas13a辅助RAA检测金黄色葡萄球菌的灵敏度为101 CFU/ml,高于real-time PCR,约102 CFU/ml,检测时间仅需30 min,与其他食源性致病菌无交叉反应;该方法和real-time PCR检测80份食品样品的阳性率均为8.75％,具有高度一致性(Kappa=1,P＞0.05). 结论 建立的CRISPR-Cas13a辅助RAA方法具有简便、快速、灵敏、特异等优点,为金黄色葡萄球菌的检测提供了新的技术手段.
其他文献
目的 检测和分析慢性阻塞性肺病(简称慢阻肺)患者并发肺部感染的病原菌分布情况、感染因素及血清炎症因子水平,并探讨其临床意义. 方法 收集2016年10月至2018年10月本院呼吸
本文讨论了垂直入射的超声纵波和横波在固体粘滞性流体界面层的反射,给出了包含流体粘滞系数的反射系数公式并对试验测量的两种固体滑移界面的反射信号作了分析.
微生物广泛存在于自然界中,与人类健康息息相关,部分微生物侵入或寄生于机体可导致人和动物疾病.分离培养等经典的微生物检测方法具有耗时长、操作复杂、仪器设备要求高等缺
目的 了解剖宫产患者产褥感染的病原菌种类及耐药性,分析患者细胞因子水平的变化. 方法 将2018年5月至2019年4月本院剖宫产术后产褥感染的60例患者作为感染组,选取同期剖宫产
目的 建立一种低浓度大体积样品中快速捕获富集大肠埃希菌O157∶H7的方法. 方法 利用链霉亲和素-生物素结合特性,将生物素标记大肠埃希菌O157∶H7特异性适配体与链霉亲和素磁
中东呼吸综合征是由中东呼吸综合征冠状病毒引起的一种具有传染性和高致死性的呼吸系统疾病,该病自2012年首次确诊以来,在全球范围内广泛传播,对全球公共卫生安全构成严重威
文章利用几何声学原理和矢量分析方法,研究了在对车轴作纵向扫查时,超声横波的传播规律和聚焦、发散条件,同时给出了探头的设计方案和有关的实验数据等.
输油管道腐蚀减薄是事故主要原因.本课题采用宽频超声液浸自动检测技术、多通道插拔式超声单元和高性能微处理器存贮器等可研制开发输油管道腐蚀检测机器人(US-pig).本系统不
本文介绍了最近开发的小口径薄壁管超声探伤系统,描述了系统的各个组成部分,包括超声探伤仪和探头,机械设备,电控设备,计算机数据采集、显示和存储设备.描述了系统的调节与操
本文介绍了压力容器锻件超声波检测关键技术,并对游动信号进行了分析,指出压力容器锻件安全认证的必要性.