【摘 要】
：
目的:明确先天性巨结肠患者携带的5个SEMA3C/SEMA3D基因错义突变对Semaphorin 3(Sema3)蛋白自身稳定性和受体亲合力的影响作用。方法:构建Sema3-Neuropilin-Plexin配体-受体
【机 构】
：
首都儿科研究所遗传研究室,首都儿科研究所附属儿童医院新生儿外科,首都儿科研究所附属儿童医院病理科,安徽医科大学,
论文部分内容阅读
目的:明确先天性巨结肠患者携带的5个SEMA3C/SEMA3D基因错义突变对Semaphorin 3(Sema3)蛋白自身稳定性和受体亲合力的影响作用。方法:构建Sema3-Neuropilin-Plexin配体-受体复合物蛋白质模型,对全部5个错义突变进行定位,通过计算标准能量功能赋值(△△G)和复合物界面值(△I_sc)预测突变对Sema3的影响作用。将野生型和突变型AP-tagged Sema3质粒分别转染HEK293T细胞,72 h后收集含有融合蛋白的细胞培养液上清并与分别表达Neuropilin 1(Nrp-1)或Neuropilin 2(Nrp-2)的COS-7细胞孵育,洗脱未结合的蛋白后加入碱性磷酸酶底物显色拍片,或提取细胞总蛋白,利用融合蛋白N-末端含有的碱性磷酸酶在底物PNPP存在时可以发生颜色变化的特性,对与受体结合的野生型和突变型AP-Sema3蛋白进行定量。结果:5个错义突变中的4个都会不同程度地影响相应Semaphorin 3蛋白与其受体Neuropilin的结合(与Nrp-1的结合:SEMA3C S329G,V337M,SEMA3D H424Q,V457I,P615T分别与野生型相比:1.12±0.15,0.37±0.03,0.56±0.07,0.51±0.05,0.66±0.05;与Nrp-2的结合:SEMA3C S329G,V337M,SEMA3D H424Q,V457I,P615T分别与野生型相比:1.18±0.09,0.37±0.03,0.76±0.01,0.65±0.06,0.85±0.03,n=3,单因素方差分析,差异有统计学意义),说明它们可能通过严重影响分子通路的信号转导而妨碍蛋白功能的正常行使。结论:先天性巨结肠患者携带的SEMA3C/SEMA3D基因错义突变可不同程度影响蛋白与其受体的结合,提示Semaphorin 3这类经典的神经元轴突导向因子在功能失常的情况下可能参与先天性巨结肠的发生。
其他文献
近年来,国内外地震灾害频发,作为能源大动脉的长距离输油气管道面临前所未有的安全隐患。鉴于地震带穿越河流管道遭受荷载情况的复杂性,根据地震带穿越河流油气管道的特点,分
结合2014年和2015年的斯隆报告,以"等级改变"为关键词,勾勒2013-2014年美国网络高等教育发展的显著特征:将网络高等教育纳入其长期发展战略规划的高校比例上升,网络学生注册
主要介绍猕猴桃的6种功能成份,即维生素、膳食纤维、微量元素、多糖、黄酮、多酚的研究近况,及猕猴桃在果实贮藏、加工工艺、保健药用方面的开发利用,为今后猕猴桃的进一步开
随着通讯行业的飞速发展,通讯基站的数量和种类越来越多。由于具备高性能、稳定性好、低价格等优点,铅酸蓄电池在通讯基站的备用电源系统中得到了普遍应用。然而,在实际的使
<正> 肾为先天之本,生命之源,元气之根,它对人体的生长、发育、衰老和健康有着极其重要的作用,肾气盛则精力充沛,健康长寿,肾气亏则元气不足百病丛生。气谓亏者,是指肾水亏空
党的十八届四中全会提出,全面推进依法治国,建设中国特色社会主义法治国家,完善行政监督机制,提高公务员队伍管理水平。财政是国家发挥政治、经济职能的物质保障,财政部门承
<正>Stargardt病(stargardt macular dystrophy,STGD)由Stargardt于1909年首次报道随即命名,该病是一种黄斑萎缩性疾病,属常染色体隐性遗传病少数为显性遗传,患者双亲多有近
网络控制系统(Networked Control Systems,NCS)是基于网络平台的控制系统。通信网络的引入,一方面给控制系统的设计带来了便利,使网络控制系统在冶金、化工、机械制造等领域
鲁迅的个性气质是内向抑郁型的,其中充满着强烈的孤独意识。在他的小说创作之中,这种孤独意识无处不在。正是这种孤独意识,鲁迅完成了自身作为思想家和文化伟人的人格塑造。
橡胶制品工业生产过程中,存在着产生污染物质,危害职工健康、污染环境的问题。本文结合橡胶加工基本工艺过程各工序特点,通过大量测定数据,对橡胶制品生产中产生的主要污染物