人hnRNPA2/B1shRNA慢病毒载体的构建

来源 :贵阳医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a619906915
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目的:构建人核内不均一核糖核蛋白A2/B1(hnRNPA2/B1)基因的短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体。方法:根据hnRNPA2/B1基因序列,设计4对hnRNPA2/B1shRNA的干扰序列和1对阴性对照序列(NC—ShRNA);合成靶序列双链DNA,与pGMLV—SC5RNAi慢病毒载体连接,通过测序鉴定阳性克隆;用构建的慢病毒表达载体和包装质粒共转染HEK293T细胞,荧光显微镜下观察转染病毒72h后细胞中绿色荧光蛋白的表达,以验证共转染是否成功,超滤法浓缩病毒原液并测定病毒滴度。结果:经酶切
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