狂犬病的分子生物学诊断

来源 :中国兽医科技 | 被引量 : 0次 | 上传用户:linlijun002
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从攻击咬伤人并致其死亡的犬脑组织中提取总RNA,用特异性引物通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)获得了长度约为1 423 bp的核酸片段,与预期的片段大小相符;将扩增产物连接到pMD 18-T 载体中,转化大肠埃希氏菌JM109,筛选氨苄青霉素抗性菌落,提取质粒,经酶切鉴定、PCR分析及测序,证明所克隆的1 423 bp片段含有完整的狂犬病病毒N基因,与国外参考毒株的序列相比同源性较高,从而做出正确的诊断.试验表明,用RT-PCR技术检测狂犬病病毒灵敏度高、特异性强,适合于实验室应用.
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