【摘 要】
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构建了亮氨酸脱氢酶(LeuDH)催化的底物偶联反应体系,打破氧化脱氨反应平衡,同时制得高附加值的α-酮异己酸(α-KIC)和L-2-氨基丁酸,并实现辅酶NAD+的高效循环再生.基于LeuDH
【机 构】
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江南大学工业生物技术教育部重点实验室,宿迁市江南大学产业技术研究院
【基金项目】
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国家自然科学基金(批准号:21336009,21176103);国家“八六三”计划项目(批准号:2015AA021004);高等学校学科创新引智计划(111计划)项目(批准号:111-2-06)资助~~
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构建了亮氨酸脱氢酶(LeuDH)催化的底物偶联反应体系,打破氧化脱氨反应平衡,同时制得高附加值的α-酮异己酸(α-KIC)和L-2-氨基丁酸,并实现辅酶NAD+的高效循环再生.基于LeuDH的底物专一性和催化动力学参数,考察了不同酮酸底物对于底物偶联反应效率的影响,选择转化率最高的2-丁酮酸作为偶联底物,使α-KIC产率由单步氧化反应的2. 75%提高至66. 82%.通过考察底物浓度、pH值、NH4+浓度和辅酶NAD+浓度等反应条件对偶联反应效率的影响,使α-KIC产率进一步提高至83. 25%,同时辅
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