登革Ⅱ型病毒M株、NGC株E基因部分序列原核载体的构建及蛋白表达

来源 :时珍国医国药 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ldwwsnake

【摘要】

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目的体外扩增登革Ⅱ型病毒M株、NGC株E基因部分序列,构建pET28a（＋）-ME、pET28a（＋）-NE,分析其在E-coli BL21中的表达。方法 PCR方法扩增（DENV-2）M株、NGC株E基因部分序列并构建原核重

【作者】

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张莉莎吕秉乐左丽

【机构】

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贵阳医学院附属医院,贵阳医学院免疫教研室

【出处】

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时珍国医国药

【发表日期】

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2011年10期

【关键词】

：

登革Ⅱ型病毒 E蛋白原核表达

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目的体外扩增登革Ⅱ型病毒M株、NGC株E基因部分序列,构建pET28a（＋）-ME、pET28a（＋）-NE,分析其在E-coli BL21中的表达。方法 PCR方法扩增（DENV-2）M株、NGC株E基因部分序列并构建原核重组载体pET28a（＋）-ME、pET28a（＋）-NE,将重组载体转化E-coli BL21,IPTG诱导表达,采用镍离子亲和层析的方法纯化目的蛋白并用SDS-PAGE电泳和Western-Blot进行鉴定。结果经双酶切、PCR和测序证实成功构建原核重组载体pET28a＋-ME、p

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