不同浓度腐胺对人皮肤成纤维细胞增殖、迁移和凋亡的影响

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目的探讨不同浓度腐胺对人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblasts,HSF)增殖、迁移、凋亡的影响。方法将体外HSF分为腐胺组和对照组,以含腐胺浓度分别为0.5、1、5、10、50、100、500、1000μg/ml完全培养基培养细胞设为腐胺组,不添加腐胺设为对照组。经对照组及不同浓度腐胺组处理的HSF培养24 h后,再以四唑化合物电子耦联显色法(MTS法)测定细胞增殖能力(用吸光度值表示),Transwell迁移实验测定细胞的迁移能力,流式细胞技术(Flow Cytometry,FCM)Annexin V/PI标记法测定细胞凋亡率。结果 (1)细胞增殖能力(MTS)测定结果显示,0.5、1、5、10μg/ml腐胺组HSF的吸光度值较对照组升高(P<0.01),并且1μg/ml时达峰值(0.754±0.024);500、1000μg/ml腐胺组HSF吸光度值较对照组降低(P<0.01);50、100μg/ml腐胺组HSF的吸光度值与对照组无明显差异(P>0.05);(2)Transwell迁移实验结果显示,1μg/ml腐胺组穿过微孔膜的细胞数目较对照组显著增加(P<0.01),且达到峰值309±21;50μg/ml及以上浓度腐胺组HSF穿过微孔膜的数目较对照组减少(P<0.05);0.5、5、10μg/ml腐胺组HSF穿过微孔膜的细胞数目与对照组比较无明显差异(P>0.05);(3)流式细胞凋亡结果显示,0.5、1、5、10μg/ml腐胺组HSF凋亡率较对照组显著降低(P<0.05),而且在1μg/ml时细胞凋亡率达最低值(11.10±0.79)%;100μg/ml及以上浓度腐胺组细胞凋亡率较对照组显著升高(P<0.01),而且随着浓度增加凋亡率逐渐升高;50μg/ml腐胺组与对照组比较细胞凋亡率无明显差异(P>0.05)。结论微量腐胺可维持细胞正常的迁移能力,显著提高HSF的细胞增殖能力,而较高浓度的腐胺能显著抑制HSF迁移与增殖,并诱导细胞发生凋亡,提示不同浓度的腐胺会对创面愈合起到完全不同的作用。
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