【摘 要】
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目的构建基于In-fusion技术的高通量新型HIV表型耐药检测系统,用于临床表型耐药检测。方法扩增LacZ基因,插入并替换原骨架质粒pLWJ-SV40-Luc中耐药检测片段构建新的骨架质粒p
【机 构】
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福建省疾病预防控制中心(福建省人兽共患病研究重点实验室),福建医科大学公共卫生学院
【基金项目】
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福建省科技厅引导性项目(No.2016Y0010);福建省卫计委中青年骨干人才培养项目(No.2015-ZQN-ZD-11)联合支持~~
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目的构建基于In-fusion技术的高通量新型HIV表型耐药检测系统,用于临床表型耐药检测。方法扩增LacZ基因,插入并替换原骨架质粒pLWJ-SV40-Luc中耐药检测片段构建新的骨架质粒pLWJ-SV40-Luc-LacZ,利用In-fusion定向克隆技术,将耐药检测片段插入到改造后的骨架质粒中构建耐药检测载体(RTV),并与膜蛋白表达质粒VSV-G共转染293T细胞产生HIV假病毒,在药物干预下,通过检测感染细胞中Luc+表达量来反应其对药物的敏感性。结果成功引入蓝白斑筛选改造出新的骨架质粒pLW
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